Клетки Caco-2

Клетките Caco-2 служат като усъвършенстван in vitro модел за човешката чревна бариера, най-вече поради диференцирането им в клетъчен монослой, който много наподобява ентероцитите, покриващи тънките черва. При култивиране на клетъчната линия Caco2 върху филтърни вложки за тъканни култури с поликарбонатни филтри, клетките Caco-2 претърпяват спонтанна диференциация. Диференциацията на клетките Caco2 води до експресия на специализирани клетъчни типове, снабдени с микровили, ензими и транспортери, което наподобява сложните характеристики и механизми, открити в ситуация in vivo.

В контекста на моделите за изследване на чревната абсорбция клетките Caco-2, които са получени от пациент с колоректален аденокарцином, са от съществено значение поради способността им да развиват високи стойности на TEER, което означава непокътнати плътни връзки и бариерна функция на епитела. Тези свойства са от решаващо значение за анализи като анализа на холестероловия ефлукс и изследванията на клетъчния транспорт, включително движението на липидни наночастици и откриването на протеинови взаимодействия.

Клетките Caco-2 са от основно значение за изследванията на чревната абсорбция, тъй като осигуряват надеждно ин витро приближение на чревния епител. Имитирайки чревни ентероцити, тези клетки улесняват анализите на пероралната абсорбция на лекарства, като симулират чревната бариера. Изследователите използват клетките Caco-2, за да предвидят как веществата преминават през чревната лигавица, което е от съществено значение за фармакокинетичното профилиране на перорални лекарства. Освен това те са ключов инструмент за изследване на чревното усвояване, хомеостазата и преноса на холестерол, които са жизненоважни процеси за разбиране на липидния метаболизъм и свързаните с него заболявания.

Клетките Caco-2 остават крайъгълен камък в изследванията на карцинома на дебелото черво и токсикологията, не само поради значението им за изследванията на стомашно-чревния тракт при човека, но и поради ролята им в осигуряването на подробен поглед върху жлъчния път, метаболизма на ксенобиотиците в дебелото черво, изследванията на рака и токсикологията.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация