İçeriğe atla
Caco-2 Hücreleri
Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Caco-2 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300137

Caco-2 hücreleri, insan bağırsak bariyeri için gelişmiş bir in vitro model işlevi görür; bunun başlıca nedeni, bu hücrelerin bir hücre tek tabakası haline farklılaşarak...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Caco-2 hücreleri, öncelikle ince bağırsağı kaplayan enterositlere yakından benzeyen bir hücre tek tabakasına farklılaşmaları nedeniyle insan bağırsak bariyeri için gelişmiş bir in vitro model olarak hizmet eder. Caco2 hücre hattı, polikarbonat filtreli doku kültürü filtre ekleri üzerinde kültürlenirken, Caco-2 hücreleri kendiliğinden farklılaşmaya uğrar. Caco2 hücrelerinin farklılaşması, in vivo durumda bulunan karmaşık özellikler ve mekanizmalara paralel olarak mikrovilluslar, enzimler ve taşıyıcılarla tamamlanan özelleşmiş hücre tiplerinin ifade edilmesiyle sonuçlanır.

Bağırsak emilim çalışmaları modelleri bağlamında, bir insan kolorektal adenokarsinom hastasından türetilen Caco-2 hücreleri, sağlam sıkı bağlantılar ve epitelyal bariyer işlevi anlamına gelen yüksek TEER değerleri geliştirme yetenekleri nedeniyle araçsaldır. Bu özellikler, kolesterol akış deneyi gibi deneyler ve lipid nanopartiküllerin hareketi ve protein etkileşimlerinin tespiti de dahil olmak üzere hücresel taşınmaya yönelik araştırmalar için çok önemlidir.

Caco-2 hücreleri, bağırsak epitelinin güvenilir bir in vitro yaklaşımını sağlayarak bağırsak emilim çalışmaları için çok önemlidir. Bağırsak enterositlerini taklit eden bu hücreler, bağırsak bariyerini simüle ederek oral ilaç emilimi analizlerini kolaylaştırır. Araştırmacılar, maddelerin bağırsak mukozasından nasıl geçtiğini tahmin etmek için Caco-2 hücrelerini kullanmaktadır; bu da oral ilaçların farmakokinetik profilinin çıkarılması için gereklidir. Ayrıca, lipid metabolizmasını ve ilişkili hastalıkları anlamak için hayati süreçler olan bağırsak kolesterol alımını, homeostazını ve taşınmasını araştırmada önemli bir araçtır.

Caco-2 hücreleri, yalnızca insan gastrointestinal çalışmalarıyla olan ilgileri nedeniyle değil, aynı zamanda safra yolu, kolondaki ksenobiyotiklerin metabolizması, kanser ve toksikoloji araştırmalarına ilişkin ayrıntılı bilgiler sağlamadaki rolleri nedeniyle kolon karsinomu ve toksikoloji araştırmalarında bir köşe taşı olmaya devam etmektedir.

Doku
Kolon
Hastalık
Adenokarsinom
Uygulamalar
GI (gastrointestinal) sistem modeli, Trans-Epitelyal/Endotelyal Eletrik Direnç (TEER) ölçümü. Caco-2 hücreleri 2000 cm2'ye kadar yüksek TEER değerleri geliştirir (CellZscope kullanılarak CLS ile ölçüldüğü gibi, nanoAnalytics, Münster, Almanya).
Eş anlamlılar
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde. Kolonik primer ile uyumlu orta derecede iyi farklılaşmış adenokarsinomlar oluşturur (derece II)
Ploidi durumu
(P14), hipertetraploid
MSI durumu
Kararlı (MSS)
İki katına çıkma süresi
60 ila 70 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CaCo-2 (Cytion katalog numarası 300137)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Isıya dayanıklı enterotoksin (Sta, E. coli), epidermal büyüme faktörü (EGF), retinoik asit bağlayıcı protein I ve retinol bağlayıcı protein II, keratin pozitif.
Antijen ekspresyonu
Kan grubu O, Rh+, HLA sınıf II negatif
İzoenzimler
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Virüs direnci
İnsan immün yetmezlik virüsü (HIV, LAV)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, yaklaşık 4 gün içinde %90 konfluent tek tabaka oluşturacaktır.
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
72 yıl
Etnik köken
Kafkas