Caco-2-celler

Caco-2-celler fungerer som en avanceret in vitro-model for den menneskelige tarmbarriere, primært på grund af deres differentiering til et cellemonolag, der ligner de enterocytter, der beklæder tyndtarmen. Når man dyrker Caco2-cellelinjen på vævskulturfilterindsatser med polykarbonatfiltre, gennemgår Caco-2-celler spontan differentiering. Differentieringen af Caco2-celler resulterer i udtrykket af specialiserede celletyper, komplet med mikrovilli, enzymer og transportører, parallelt med de komplekse funktioner og mekanismer, der findes i en in vivo-situation.

I forbindelse med modeller til undersøgelse af tarmabsorption er Caco-2-celler, som stammer fra en human kolorektal adenokarcinom-patient, vigtige på grund af deres evne til at udvikle høje TEER-værdier, hvilket betyder intakte tight junctions og epitelial barrierefunktion. Disse egenskaber er afgørende for analyser som kolesterol efflux-analysen og undersøgelser af cellulær transport, herunder bevægelse af lipidnanopartikler og påvisning af proteininteraktioner.

Caco-2-celler er afgørende for undersøgelser af tarmabsorption, da de giver en pålidelig in vitro-tilnærmelse af tarmepitelet. Disse celler efterligner tarmens enterocytter og letter analyser af oral lægemiddelabsorption ved at simulere tarmbarrieren. Forskere bruger Caco-2-celler til at forudsige, hvordan stoffer krydser tarmslimhinden, hvilket er afgørende for den farmakokinetiske profilering af oral medicin. Desuden er de et vigtigt redskab til at undersøge kolesteroloptagelse, -homeostase og -transport i tarmen, hvilket er afgørende processer for at forstå lipidmetabolisme og tilknyttede sygdomme.

Caco-2-celler er fortsat en hjørnesten i forskning i tyktarmskarcinom og toksikologi, ikke kun på grund af deres relevans for undersøgelser af mave-tarmkanalen hos mennesker, men også på grund af deres rolle i at give detaljeret indsigt i galdevejene, metabolismen af xenobiotika i tyktarmen, kræft og toksikologisk forskning.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring