Mine otse sisu juurde
Caco-2 rakud
Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
CaCo-2, CACO-2, Caco 2, CACO 2, CACO2, CaCo2, CaCO2, Caco2, Caco-II

Dokumendid

Caco-2 rakud

Cell line · Toote number 300137

Caco-2 rakud on inimese soolebarjääri arenenud in vitro mudel, peamiselt tänu sellele, et need diferentseeruvad rakumonokihiks, mis sulgeb...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Caco-2 rakud on inimese soolebarjääri täiustatud in vitro mudeliks, peamiselt tänu nende diferentseerumisele rakumonokihiks, mis sarnaneb väga täpselt peensoolt vooderdavate enterotsüütidega. Caco2 rakuliini kasvatamisel polükarbonaatfiltritega koekultuurifiltri sisestustel toimub Caco-2 rakkude spontaanne diferentseerumine. Caco2 rakkude diferentseerumise tulemuseks on spetsialiseerunud rakutüüpide ekspressioon koos mikrovillide, ensüümide ja transporteritega, mis on paralleelselt in vivo situatsioonis esinevate keeruliste omaduste ja mehhanismidega.

Soolestiku imendumisuuringute mudelite kontekstis on Caco-2 rakud, mis on saadud inimese kolorektaalse adenokartsinoomi patsiendilt, olulised tänu nende võimele arendada kõrgeid TEER-väärtusi, mis tähendab intaktseid tihedaid ühendusi ja epiteelibarjääri funktsiooni. Need omadused on olulised selliste analüüside jaoks nagu kolesterooli väljavooluproov ja rakutranspordi uuringud, sealhulgas lipiidide nanoosakeste liikumine ja valkude koostoimete tuvastamine.

Caco-2 rakud on soolestiku imendumise uuringutes keskse tähtsusega, kuna nad pakuvad usaldusväärset in vitro lähenemist soolestiku epiteelile. Soolestiku enterotsüüte jäljendavad rakud hõlbustavad ravimite suukaudse imendumise analüüsi, simuleerides soolebarjääri. Teadlased kasutavad Caco-2 rakke, et ennustada, kuidas ained läbivad soole limaskesta, mis on oluline suukaudsete ravimite farmakokineetilise profiili koostamisel. Lisaks on need rakud peamine vahend kolesterooli soolestiku omastamise, homöostaasi ja transpordi uurimisel, mis on olulised protsessid lipiidide metabolismi ja sellega seotud haiguste mõistmiseks.

Caco-2 rakud on jätkuvalt käärsoole kartsinoomi ja toksikoloogia uuringute nurgakivi, mitte ainult nende tähtsuse tõttu inimese seedetrakti uuringutes, vaid ka nende rolli tõttu üksikasjaliku ülevaate andmisel sapiteede, ksenobiootikumide metabolismi kohta käärsoolestikus, vähi ja toksikoloogia uuringutes.

Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Rakendused
Seedetrakti (seedetrakti) mudel, trans-epiteliaalse/endoteliaalse elektrilise resistentsuse (TEER) mõõtmine. Caco-2 rakkudel tekivad kõrged TEER-väärtused kuni 2000 cm2 (mõõdetuna CLS-ga, kasutades CellZscope'i, nanoAnalytics, Münster, Saksamaa).
Sünonüümid
  • CaCo-2
  • CACO-2
  • Caco 2
  • CACO 2
  • CACO2
  • CaCo2
  • CaCO2
  • Caco2
  • Caco-II

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustavad mõõdukalt diferentseerunud adenokartsinoome, mis vastavad koloniidi primaarsele (II aste)
Ploidsus
(P14), hüpertetraploidne
MSI staatus
Stabiilne (MSS)
Kahekordistumisaeg
60-70 tundi

04Tunnused

Viide
CaCo-2 (Cytioni katalooginumber 300137)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0025

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Kuumastabiilne enterotoksiin (Sta, E. coli), epidermise kasvufaktor (EGF), retiinhapet siduv valk I ja retinooli siduv valk II, keratiin positiivne.
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp O, Rh+, HLA II klassi negatiivne
Isoensüümid
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B.
Viirusresistentsus
Inimese immuunpuudulikkuse viirus (HIV, LAV)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul 90% konfluentse monokihi.
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
72 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia