Células Caco-2

As células Caco-2 constituem um modelo avançado in vitro da barreira intestinal humana, principalmente devido à sua diferenciação numa monocamada de células que se assemelha muito aos enterócitos que revestem o intestino delgado. Ao cultivar a linha de células Caco2 em inserções de filtro de cultura de tecidos com filtros de policarbonato, as células Caco-2 sofrem uma diferenciação espontânea. A diferenciação das células Caco2 resulta na expressão de tipos de células especializadas, completas com microvilosidades, enzimas e transportadores, em paralelo com as caraterísticas e mecanismos complexos encontrados numa situação in vivo.

No contexto dos modelos de estudos de absorção intestinal, as células Caco-2, que foram derivadas de um doente com adenocarcinoma colorrectal humano, são fundamentais devido à sua capacidade de desenvolver valores TEER elevados, o que significa junções estanques intactas e função de barreira epitelial. Estas propriedades são cruciais para ensaios como o ensaio de efluxo de colesterol e investigações sobre o transporte celular, incluindo o movimento de nanopartículas lipídicas e a deteção de interações proteicas.

As células Caco-2 são fundamentais para os estudos de absorção intestinal, proporcionando uma aproximação fiável in vitro do epitélio intestinal. Imitando os enterócitos intestinais, estas células facilitam a análise da absorção oral de medicamentos, simulando a barreira intestinal. Os investigadores utilizam as células Caco-2 para prever a forma como as substâncias atravessam a mucosa intestinal, o que é essencial para a caraterização farmacocinética dos medicamentos orais. Além disso, são uma ferramenta fundamental para investigar a absorção, a homeostase e o transporte do colesterol intestinal, que são processos vitais para compreender o metabolismo dos lípidos e as doenças associadas.

As células Caco-2 continuam a ser uma pedra angular na investigação do carcinoma do cólon e da toxicologia, não só pela sua relevância para os estudos gastrointestinais humanos, mas também pelo seu papel no fornecimento de informações pormenorizadas sobre a via biliar, o metabolismo dos xenobióticos no cólon, o cancro e a investigação toxicológica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia