Gå direkte til indholdet
HCT116-celler
Væv
Kolorektal
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Dokumenter

HCT116-celler

Cell line · Varenummer 300195

HCT116-celler, der er isoleret fra en patient med tyktarmskræft, spiller en afgørende rolle i terapeutiske undersøgelser og lægemiddelscreeninger, især inden for forskningen i tyktarmskræft...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCT116-celler, der er isoleret fra en tyktarmskræftpatient, spiller en afgørende rolle i terapeutiske undersøgelser og screening af lægemidler, især inden for forskning i tyktarmskræft. HCT-116-celler er kendt for en mutation i kodon 13 i KRAS-proto-onkogenet, hvilket fremhæver deres anvendelighed i genterapiforskning, især fordi de er modtagelige for transfektion med virale vektorer. I apoptoseforskningen er HCT116-celler centrale for studiet af mekanismerne bag apoptose og celledød.

Virkningerne af butyrat, en kortkædet fedtsyre, er blevet grundigt undersøgt i HCT116-celler og har afsløret, at butyrat hæmmer spredning af tyktarmskræft ved at fremkalde apoptose, hvilket fremhæver det komplicerede samspil mellem kræft og celler og de bredere konsekvenser for kræftforskningen. Butyrats rolle i at modulere ændringer i genekspression og inducere endoplasmatisk retikulum-stressrespons i HCT116-celler understreger den cellulære kompleksitet i cellelinjer for kolorektal cancer.

Interaktionen mellem HCT116-tarmkræftceller og terapeutiske midler som metformin, der er kendt for sin ældre effekt og potentiale til at reducere risikoen for kræft, er af betydelig interesse. Metformins indflydelse på HCT116-tyktarmscellers spredning, modulering af p21-proteinniveauet og dets bredere konsekvenser for spredning og vækst giver indsigt i behandlingen af primære tumorer og forebyggelse af tumorer og metastaser.

HCT116-celler er uvurderlige for onkologisk forskning, da de giver kritisk indsigt i effekten af terapeutiske midler og den molekylære dynamik i kræftprogression. Med en bemærkelsesværdig KRAS-mutation og modtagelighed for transfektion letter disse celler genterapiundersøgelser, apoptoseanalyse og strategier for behandling og forebyggelse af kolorektal cancer.

Væv
Kolorektal
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus (inokulum på 5-10 x 106 celler)
Ploidistatus
Aneuploid
MSI-status
Ustabil (MSI-høj)
Karyotype
HCT116-cellernes karyotype er næsten diploid, og 70 % af cellerne har 45 kromosomer, som ofte viser en overrepræsentation af kromosomerne 8, 10, 16 og 17 på de lange arme sammen med fraværet af Y-kromosomet.
Fordoblingstid
25 til 35 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCT116 (Cytion katalognummer 300195)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Cellerne er positive for keratin ved immunoperoxidasefarvning. HCT 116-celler er positive for udtryk af transformerende vækstfaktor beta 1 (TGF beta 1) og beta 2 (TGF beta 2).

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukose, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
1 til 2 gange om ugen
Genopretning efter optøning
3 dage
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
48 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk