
- Audums
- Kolorektālais
- Slimība
- Adenokarcinoma
- Sinonīmi
- HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2
Dokumenti
HCT116 šūnas
Cell line · Preces numurs 300195
HCT116 šūnas, kas izdalītas no resnās zarnas vēža pacienta, pilda izšķirošu lomu terapeitiskajos pētījumos un zāļu skrīningā, jo īpaši resnās zarnas vēža pētniecībā...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HCT116 šūnasCell line€430.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HCT116 šūnām, kas izolētas no resnās zarnas vēža pacienta, ir būtiska nozīme terapeitiskos pētījumos un zāļu pārbaudēs, jo īpaši resnās zarnas vēža pētījumos. HCT-116 šūnās ir atpazīta KRAS protoonkogēna 13. kodona mutācija, kas norāda uz to lietderību gēnu terapijas pētījumos, jo īpaši tāpēc, ka tās ir viegli transfekējamas ar vīrusu vektoriem. Apoptozes pētījumos HCT116 šūnas ir ļoti svarīgas, lai pētītu apoptozes un šūnu nāves mehānismus.
Īsas ķēdes taukskābes butirāta iedarbība ir plaši pētīta HCT116 šūnās, atklājot, ka butirāts kavē resnās zarnas vēža proliferāciju, izraisot apoptozi, uzsverot sarežģīto vēža un šūnas mijiedarbību un plašāku ietekmi uz vēža pētījumiem. Butirāta loma gēnu ekspresijas izmaiņu modulēšanā un endoplazmatiskā retikuluma stresa reakcijas izraisīšanā HCT116 šūnās uzsver kolorektālā vēža šūnu līniju šūnu sarežģītību.
Ievērojamu interesi izraisa HCT116 resnās zarnas vēža šūnu mijiedarbība ar tādiem terapeitiskiem līdzekļiem kā metformīns, kas ir pazīstams ar savu leģējošo iedarbību un potenciālu samazināt vēža risku. Metformīna ietekme uz HCT116 resnās zarnas vēža šūnu proliferāciju, p21 proteīna līmeņa modulāciju un tā plašāka ietekme uz proliferāciju un augšanu piedāvā ieskatu primāro audzēju ārstēšanā un audzēju un metastāžu profilaksē.
HCT116 šūnas ir nenovērtējamas onkoloģiskajos pētījumos, sniedzot būtisku ieskatu par terapijas efektivitāti un vēža progresēšanas molekulāro dinamiku. Pateicoties ievērojamai KRAS mutācijai un uzņēmībai pret transfekciju, šīs šūnas atvieglo gēnu terapijas pētījumus, apoptozes analīzi un kolorektālā vēža ārstēšanas un profilakses stratēģijas.
- Audums
- Kolorektālais
- Slimība
- Adenokarcinoma
- Sinonīmi
- HCT-116
- HCT.116
- HCT_116
- HCT 116
- CoCL2
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Tumorogēns
- Jā, kailām pelēm (5-10 x 106 šūnu inokulāts)
- Ploidijas statuss
- Aneuploīds
- MSI statuss
- Nestabils (MSI-high)
- Kariotips
- HCT116 šūnu kariotips ir gandrīz diploīds, 70 % šūnu ir 45 hromosomas, un bieži vien garajos atzaros ir pārāk daudz 8., 10., 16. un 17. hromosomas, kā arī nav Y hromosomas.
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- 25 līdz 35 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- HCT116 (Cytion kataloga numurs 300195)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0291
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- Imunoperoksidāzes krāsojumā šūnas ir pozitīvas keratīna noteikšanai. HCT 116 šūnām ir pozitīva transformējošā augšanas faktora beta 1 (TGF beta 1) un beta 2 (TGF beta 2) ekspresija.
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 2 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 1 līdz 2 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- 3 dienas
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 48 gadi
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
.jpg)
