Pāriet uz saturu
HCT116 šūnas
Audums
Kolorektālais
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT 116, CoCL2

Dokumenti

HCT116 šūnas

Cell line · Preces numurs 300195

HCT116 šūnas, kas izdalītas no resnās zarnas vēža pacienta, pilda izšķirošu lomu terapeitiskajos pētījumos un zāļu skrīningā, jo īpaši resnās zarnas vēža pētniecībā...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCT116 šūnām, kas izolētas no resnās zarnas vēža pacienta, ir būtiska nozīme terapeitiskos pētījumos un zāļu pārbaudēs, jo īpaši resnās zarnas vēža pētījumos. HCT-116 šūnās ir atpazīta KRAS protoonkogēna 13. kodona mutācija, kas norāda uz to lietderību gēnu terapijas pētījumos, jo īpaši tāpēc, ka tās ir viegli transfekējamas ar vīrusu vektoriem. Apoptozes pētījumos HCT116 šūnas ir ļoti svarīgas, lai pētītu apoptozes un šūnu nāves mehānismus.

Īsas ķēdes taukskābes butirāta iedarbība ir plaši pētīta HCT116 šūnās, atklājot, ka butirāts kavē resnās zarnas vēža proliferāciju, izraisot apoptozi, uzsverot sarežģīto vēža un šūnas mijiedarbību un plašāku ietekmi uz vēža pētījumiem. Butirāta loma gēnu ekspresijas izmaiņu modulēšanā un endoplazmatiskā retikuluma stresa reakcijas izraisīšanā HCT116 šūnās uzsver kolorektālā vēža šūnu līniju šūnu sarežģītību.

Ievērojamu interesi izraisa HCT116 resnās zarnas vēža šūnu mijiedarbība ar tādiem terapeitiskiem līdzekļiem kā metformīns, kas ir pazīstams ar savu leģējošo iedarbību un potenciālu samazināt vēža risku. Metformīna ietekme uz HCT116 resnās zarnas vēža šūnu proliferāciju, p21 proteīna līmeņa modulāciju un tā plašāka ietekme uz proliferāciju un augšanu piedāvā ieskatu primāro audzēju ārstēšanā un audzēju un metastāžu profilaksē.

HCT116 šūnas ir nenovērtējamas onkoloģiskajos pētījumos, sniedzot būtisku ieskatu par terapijas efektivitāti un vēža progresēšanas molekulāro dinamiku. Pateicoties ievērojamai KRAS mutācijai un uzņēmībai pret transfekciju, šīs šūnas atvieglo gēnu terapijas pētījumus, apoptozes analīzi un kolorektālā vēža ārstēšanas un profilakses stratēģijas.

Audums
Kolorektālais
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT 116
  • CoCL2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm (5-10 x 106 šūnu inokulāts)
Ploidijas statuss
Aneuploīds
MSI statuss
Nestabils (MSI-high)
Kariotips
HCT116 šūnu kariotips ir gandrīz diploīds, 70 % šūnu ir 45 hromosomas, un bieži vien garajos atzaros ir pārāk daudz 8., 10., 16. un 17. hromosomas, kā arī nav Y hromosomas.
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
25 līdz 35 stundas

04Identifikatori

Atsauce
HCT116 (Cytion kataloga numurs 300195)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Imunoperoksidāzes krāsojumā šūnas ir pozitīvas keratīna noteikšanai. HCT 116 šūnām ir pozitīva transformējošā augšanas faktora beta 1 (TGF beta 1) un beta 2 (TGF beta 2) ekspresija.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
1 līdz 2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
3 dienas
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
48 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis