Tartalomra ugrás
Calu-1 sejtek
Szövet
Tüdő
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1

Dokumentumok

Calu-1 sejtek

Cell line · Termékszám 300141

A Calu-1 sejtvonal emberi tüdőkarcinómából, pontosabban nem kissejtes tüdőrákból (NSCLC) származik. A pleurális folyadékból állították elő...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Calu-1 sejtvonal humán tüdőrákból, különösen nem kissejtes tüdőrákból (NSCLC) származik. Egy 47 éves kaukázusi férfi mellhártyájából állították elő, akinek a tüdő epidermoid karcinómája volt. Ez a sejtvonal epithelszerű morfológiát mutat, és széles körben használták a tüdőrák biológiájára, a gyógyszerek szűrésére és a citotoxicitási vizsgálatokra összpontosító kutatásokban. A Calu-1 sejtek a tüdő epitélsejtekre jellemző számos markert expresszálnak, és értékes modellként szolgálnak a tüdőkarcinogenezisben és a terápiás rezisztenciában szerepet játszó molekuláris útvonalak tanulmányozásához.

A Calu-1 sejtek ismertek magas proliferációs rátájukról és a tenyésztésben való robusztusságukról, ami alkalmassá teszi őket in vitro kísérleti elrendezésekhez. Számos, a rákos sejtekre jellemző kromoszóma-rendellenességet őriznek, többek között a 7. és 20. kromoszóma többszörös kópiáját, ami bizonyítja hasznosságukat genetikai és citogenetikai vizsgálatokban. A sejtvonal mutációkat is mutat a kulcsfontosságú onkogénekben és tumorszupresszor génekben, mint például a KRAS és a TP53, amelyek különösen érdekesek a tüdőrák kutatásában. Ezek a genetikai jellemzők a Calu-1-et hasznos eszközzé teszik a genetikai változásoknak a rák progressziójára gyakorolt hatásának vizsgálatára és a célzott terápiák hatékonyságának kontrollált környezetben történő tesztelésére.

Szövet
Tüdő
Betegség
Karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
  • CaLu-1
  • CALU-1
  • Calu.1
  • CALU 1
  • Calu 1
  • CALU1
  • Calu1

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epidermoid
Kariotípus
A törzsvonal kromoszómaszáma hipotriploid, és a 2S komponens 14,2%-ban fordult elő. A modális kromoszómaszám 62. Hét marker fordult elő gyakran, az M1 (sejtenként két példány), az M6 és M7 a legtöbb sejtben megtalálható volt, az M2 és M3, valamint az M4 és M5 kölcsönösen kizárónak tűnt, azaz az M2-ből vagy az M3-ból csak egy, az M4-ből vagy az M5-ből csak egy volt jelen minden sejtben. Y kromoszómát nem mutatott ki a QM sávok vizsgálata, bár a sejtvonalat hímivarúból indították.

04Azonosítók

Hivatkozás
Calu-1 (Cytion katalógusszám: 300141)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0608

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
P53 negatív
Antigén-expresszió
A vércsoport, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35, HLA A10, A11, B15, Bw35
Izoenzimek
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotípus gyakorisági termék: 0.0359
Onkogének
K-ras onkogén pozitív.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt 90%-os konfluens monoréteget eredményez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 2 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felépüljenek a fagyasztási folyamatból, és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
47 év