Preskoči na vsebino
Celice Calu-1
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1

Dokumenti

Celice Calu-1

Cell line · Številka izdelka 300141

Celična linija Calu-1 izvira iz človeškega pljučnega karcinoma, natančneje iz nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC). Ustanovljena je bila iz plevralnega izliva iz...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Calu-1 izvira iz človeškega pljučnega karcinoma, zlasti iz nedrobnoceličnega pljučnega raka (NSCLC). Vzpostavljena je bila iz plevralnega izliva 47-letnega kavkaškega moškega z epidermoidnim karcinomom pljuč. Ta celična linija ima morfologijo, podobno epitelijski, in se pogosto uporablja v raziskavah, ki se osredotočajo na biologijo pljučnega raka, pregledovanje zdravil in študije citotoksičnosti. Celice Calu-1 izražajo več označevalcev, značilnih za pljučne epitelijske celice, in so dragocen model za preučevanje molekularnih poti, ki so vključene v pljučno karcinogenezo in odpornost na zdravljenje.

Celice Calu-1 so znane po visoki stopnji proliferacije in robustnosti v kulturi, zaradi česar so primerne za in vitro eksperimentalne nastavitve. Ohranjajo več kromosomskih nepravilnosti, ki so značilne za rakave celice, vključno z več kopijami kromosomov 7 in 20, kar dokazuje njihovo uporabnost v genetskih in citogenetskih študijah. Celična linija ima tudi mutacije v ključnih onkogenih in tumorskih supresorskih genih, kot sta KRAS oziroma TP53, ki so še posebej zanimivi pri raziskavah pljučnega raka. Zaradi teh genetskih značilnosti je Calu-1 uporabno orodje za raziskovanje vpliva genetskih sprememb na napredovanje raka in za preizkušanje učinkovitosti ciljnih terapij v nadzorovanem okolju.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Karcinom
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • CaLu-1
  • CALU-1
  • Calu.1
  • CALU 1
  • Calu 1
  • CALU1
  • Calu1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epidermoidni
Kariotip
Kromosomsko število stebelne linije je hipotriploidno, komponenta 2S pa je 14,2-odstotna. Modalno število kromosomov je 62. Sedem označevalcev se je pojavljalo pogosto, M1 (dve kopiji na celico), M6 in M7 so bili najdeni v večini celic, M2 in M3 ter M4 in M5 so se medsebojno izključevali, tj. v vsaki celici je bil prisoten samo en označevalec M2 ali M3 in en označevalec M4 ali M5. Kromosoma Y s pregledom pasov QM niso odkrili, čeprav je bila celična linija pridobljena iz moškega.

04Identifikatorji

Navajanje vira
Calu-1 (kataloška številka Cytion 300141)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0608

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 negativen
Ekspresija antigena
Krvna skupina A, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35
Izoenzimi
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0359
Onkogeni
Pozitiven onkogen K-ras.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh povzročilo 90 % konfluentno monoslojno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju nanesite celice v koncentraciji 2 x 104 celic/cm2 in pustite, da se celice opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo za najmanj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
47 let