Gå direkte til indholdet
Calu-1-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1

Dokumenter

Calu-1-celler

Cell line · Varenummer 300141

Calu-1-cellelinjen stammer fra humant lungekræft, nærmere bestemt ikke-småcellet lungekræft (NSCLC). Den blev etableret ud fra pleuralvæske fra...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Calu-1-cellelinjen stammer fra humant lungekarcinom, specifikt ikke-småcellet lungekræft (NSCLC). Den blev etableret fra pleuraeffusionen fra en 47-årig kaukasisk mand med epidermoid lungekarcinom. Denne cellelinje har en epitellignende morfologi og er blevet brugt i vid udstrækning i forskning med fokus på lungekræftbiologi, screening af lægemidler og cytotoksicitetsundersøgelser. Calu-1-celler udtrykker flere markører, der er karakteristiske for lungeepitelceller, og har været en værdifuld model til undersøgelse af de molekylære veje, der er involveret i lungecarcinogenese og terapiresistens.

Calu-1-celler er kendt for deres høje spredningshastighed og robusthed i kultur, hvilket gør dem velegnede til in vitro-forsøgsopstillinger. De har flere kromosomale abnormiteter, som er typiske for kræftceller, herunder flere kopier af kromosom 7 og 20, hvilket viser deres anvendelighed i genetiske og cytogenetiske undersøgelser. Cellelinjen udviser også mutationer i vigtige onkogener og tumorundertrykkende gener som henholdsvis KRAS og TP53, som er af særlig interesse for forskning i lungekræft. Disse genetiske egenskaber gør Calu-1 til et nyttigt værktøj til at undersøge genetiske ændringers indvirkning på kræftprogression og til at teste effekten af målrettede terapier i et kontrolleret miljø.

Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
  • CaLu-1
  • CALU-1
  • Calu.1
  • CALU 1
  • Calu 1
  • CALU1
  • Calu1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epidermoid
Karyotype
Stamlinjens kromosomtal er hypotriploid, og 2S-komponenten forekom med 14,2 %. Det modale kromosomtal er 62. Syv markører forekom hyppigt, M1 (to kopier pr. celle), M6 og M7 blev fundet i de fleste celler, M2 og M3, og M4 og M5 syntes at være gensidigt udelukkende, dvs. kun en af M2 eller M3 og en af M4 eller M5 var til stede i hver celle. Y-kromosom blev ikke påvist ved QM-båndundersøgelse, selv om cellelinjen var initieret fra en mand.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Calu-1 (Cytion katalognummer 300141)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0608

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53 negativ
Antigenudtryk
Blodtype A, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35
Isoenzymer
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0359
Onkogener
K-ras onkogen positiv.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 2 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
47 år