Mine otse sisu juurde
Calu-1 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1

Dokumendid

Calu-1 rakud

Cell line · Toote number 300141

Calu-1 rakuliin pärineb inimese kopsuvähist, täpsemalt mitteväikerakk-kopsuvähist (NSCLC). See loodi pleuraefusioonist...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Calu-1 rakuliin pärineb inimese kopsukartsinoomist, täpsemalt mitteväikerakk-kopsuvähist (NSCLC). See loodi 47-aastase kaukaasia mehe kopsu epidermoidkartsinoomiga pleuraefusioonist. Sellel rakuliinil on epiteelilaadne morfoloogia ja seda on laialdaselt kasutatud kopsuvähi bioloogia, ravimite skriiningu ja tsütotoksilisuse uuringutes. Calu-1 rakud ekspresseerivad mitmeid kopsu epiteelirakkudele iseloomulikke markereid ja on olnud väärtuslik mudel kopsu kantserogeneesi ja raviresistentsuse molekulaarradade uurimiseks.

Calu-1 rakud on tuntud oma kõrge proliferatsioonikiiruse ja vastupidavuse poolest kultuuris, mistõttu sobivad nad in vitro katseseadeldisteks. Nad säilitavad mitmeid vähirakkudele iseloomulikke kromosoomianomaaliaid, sealhulgas kromosoomide 7 ja 20 mitu koopiat, mis näitab nende kasulikkust geneetilistes ja tsütogeneetilistes uuringutes. Rakuliinil esinevad ka mutatsioonid olulistes onkogeenides ja kasvajasupressorgeenides, nagu vastavalt KRAS ja TP53, mis pakuvad erilist huvi kopsuvähi uurimisel. Need geneetilised omadused muudavad Calu-1 kasulikuks vahendiks geneetiliste muutuste mõju uurimiseks vähi progresseerumisele ja sihtotstarbeliste ravimeetodite tõhususe testimiseks kontrollitud keskkonnas.

Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • CaLu-1
  • CALU-1
  • Calu.1
  • CALU 1
  • Calu 1
  • CALU1
  • Calu1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epidermoid
Karyotüüp
Tüveliini kromosoomide arv on hüpotriploidne ja 2S-komponent esineb 14,2% ulatuses. Modaalne kromosoomide arv on 62. Seitse markerit esinesid sageli, M1 (kaks koopiat raku kohta), M6 ja M7 esinesid enamikus rakkudes, M2 ja M3 ning M4 ja M5 tundusid olevat üksteist välistavad, st igas rakus esines ainult üks M2 või M3 ja üks M4 või M5. Y-kromosoomi ei tuvastatud QM-ribade uurimisel, kuigi rakuliin oli algatatud isasloomast.

04Tunnused

Viide
Calu-1 (Cytioni katalooginumber 300141)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0608

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne
Antigeeni ekspressioon
Veregrupp A, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35
Isoensüümid
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0359
Onkogeenid
K-ras onkogeeni positiivne.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul 90% konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 2 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
47 aastat