
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Syöpä
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1
Asiakirjat
Calu-1-solut
Cell line · Tuotenumero 300141
Calu-1-solulinja on peräisin ihmisen keuhkosyövästä, tarkemmin sanottuna ei-pienisoluista keuhkosyövästä (NSCLC). Se on eristetty keuhkopussin nestekertymästä...
Räätälöinti / Suositukset
- Calu-1-solutCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
Calu-1-solulinja on peräisin ihmisen keuhkosyövästä, erityisesti ei-pienisoluisesta keuhkosyövästä (NSCLC). Se perustettiin 47-vuotiaan valkoihoisen miehen, jolla oli keuhkojen epidermoideaalinen karsinooma, pleuraeritteestä. Tällä solulinjalla on epiteelin kaltainen morfologia, ja sitä on käytetty laajalti keuhkosyövän biologiaan, lääkkeiden seulontaan ja sytotoksisuustutkimuksiin keskittyvässä tutkimuksessa. Calu-1-solut ilmentävät useita keuhkoepiteelisoluille tyypillisiä merkkiaineita, ja ne ovat olleet arvokas malli keuhkokarsinogeneesiin ja hoitoresistenssiin liittyvien molekyylireittien tutkimiseen.
Calu-1-solut ovat tunnettuja korkeasta proliferaatiovauhdistaan ja kestävyydestään viljelyssä, minkä vuoksi ne soveltuvat in vitro -koejärjestelyihin. Niissä on useita syöpäsoluille tyypillisiä kromosomipoikkeavuuksia, muun muassa kromosomien 7 ja 20 useita kopioita, mikä osoittaa niiden hyödyllisyyden geneettisissä ja sytogeneettisissä tutkimuksissa. Solulinjassa on myös mutaatioita keskeisissä onkogeeneissä, kuten KRAS- ja TP53-geeneissä, jotka ovat erityisen kiinnostavia keuhkosyöpätutkimuksessa. Nämä geneettiset ominaisuudet tekevät Calu-1:stä käyttökelpoisen välineen, jolla voidaan tutkia geneettisten muutosten vaikutusta syövän etenemiseen ja testata kohdennettujen hoitojen tehoa kontrolloidussa ympäristössä.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Syöpä
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- CaLu-1
- CALU-1
- Calu.1
- CALU 1
- Calu 1
- CALU1
- Calu1
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Epidermoidi
- Karyotyyppi
- Kantalinjan kromosomiluku on hypotriploidi, ja 2S-komponenttia esiintyi 14,2 prosenttia. Modaalinen kromosomiluku on 62. Seitsemän merkkiainetta esiintyi usein, M1 (kaksi kopiota solua kohti), M6 ja M7 esiintyivät useimmissa soluissa, M2 ja M3 sekä M4 ja M5 näyttivät olevan toisensa poissulkevia, eli vain yksi M2:sta tai M3:sta ja yksi M4:stä tai M5:stä esiintyi kussakin solussa. Y-kromosomia ei havaittu QM-kaistatutkimuksessa, vaikka solulinja oli peräisin uroksesta.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- Calu-1 (Cytionin luettelonumero 300141)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0608
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- P53 negatiivinen
- Antigeenin ilmentyminen
- Veriryhmä A, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35
- Isoentsyymit
- Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0359
- Onkogeenit
- K-ras-onkogeeni positiivinen.
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2 tuottaa 90 %:n konfluenttisen monokerroksen noin 4 päivässä.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 2 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 47 vuotta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä