Ga naar de inhoud
Calu-1-cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
CaLu-1, CALU-1, Calu.1, CALU 1, Calu 1, CALU1, Calu1

Documenten

Calu-1-cellen

Cell line · Productnummer 300141

De Calu-1-cellijn is afkomstig van een menselijk longcarcinoom, meer bepaald niet-kleincellige longkanker (NSCLC). Deze cellijn is gekweekt uit de pleurale effusie van...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Calu-1 cellijn is afkomstig van humaan longcarcinoom, specifiek niet-kleincellig longkanker (NSCLC). De lijn is ontstaan uit de pleurale effusie van een 47-jarige Kaukasische man met epidermoïd carcinoom van de long. Deze cellijn vertoont een epitheliale morfologie en is uitgebreid gebruikt in onderzoek naar longkankerbiologie, het screenen van medicijnen en cytotoxiciteitsstudies. Calu-1 cellen drukken verschillende markers uit die karakteristiek zijn voor longepitheelcellen en zijn een waardevol model voor het bestuderen van de moleculaire pathways die betrokken zijn bij longcarcinogenese en therapieresistentie.

Calu-1 cellen staan bekend om hun hoge proliferatie en robuustheid in cultuur, waardoor ze geschikt zijn voor in vitro experimentele opstellingen. Ze hebben verschillende chromosomale afwijkingen die typerend zijn voor kankercellen, waaronder meerdere kopieën van chromosomen 7 en 20, wat hun nut voor genetische en cytogenetische studies aantoont. De cellijn vertoont ook mutaties in belangrijke oncogenen en tumorsuppressorgenen zoals respectievelijk KRAS en TP53, die van bijzonder belang zijn in longkankeronderzoek. Deze genetische eigenschappen maken Calu-1 een nuttig instrument voor het onderzoeken van de invloed van genetische veranderingen op de progressie van kanker en voor het testen van de werkzaamheid van doelgerichte therapieën in een gecontroleerde omgeving.

Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • CaLu-1
  • CALU-1
  • Calu.1
  • CALU 1
  • Calu 1
  • CALU1
  • Calu1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epidermoïd
Karyotype
Het chromosoomnummer van de stamlijn is hypotriploïd en de 2S-component kwam voor bij 14,2%. Het modale chromosoomnummer is 62. Zeven markers kwamen frequent voor, M1 (twee kopieën per cel), M6 en M7 werden in de meeste cellen gevonden, M2 en M3, en M4 en M5 leken elkaar uit te sluiten, dat wil zeggen dat slechts één van M2 of M3, en één van M4 of M5 in elke cel aanwezig waren. Y-chromosoom werd niet gedetecteerd door QM-bandonderzoek, hoewel de cellijn afkomstig was van een mannetje.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Calu-1 (Cytion catalogusnummer 300141)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0608

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53 negatief
Antigeenexpressie
Bloedgroep A, Rh+, HLA A10, A11, B15, Bw35
Iso-enzymen
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotype Frequentie Product: 0.0359
Oncogenen
K-ras oncogen positief.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 resulteert in een 90% confluente monolaag in ongeveer 4 dagen.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 2 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
47 jaar