Tartalomra ugrás
HROC103 T0 M1
Szövet
Colorectalis, PDx (betegből származó xenograft) primer CRC-szövetből (Colon ascendens, TNM stádium T2N1M0R0L0V0, G2 fokozat, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Regionális nyirokcsomó-érintettség (TNM N1; a vizsgált 23 nyirokcsomóból 2-ben Lk(n)+); távoli áttét nincs (M0)
Szinonimák
HROC103

Dokumentumok

HROC103 T0 M1

Cell line · Termékszám 300802

This is one of a series of cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from a PDTx (Patient-derived Tumor xenograft) since 2006.

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás
Ez egyike azon sejtvonalak sorozatának, amelyeket Dr. Michael Linnebacher PD 2006 óta PDTx (betegből származó tumor xenograft) sejtekből hozott létre.
Szövet
Colorectalis, PDx (betegből származó xenograft) primer CRC-szövetből (Colon ascendens, TNM stádium T2N1M0R0L0V0, G2 fokozat, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Regionális nyirokcsomó-érintettség (TNM N1; a vizsgált 23 nyirokcsomóból 2-ben Lk(n)+); távoli áttét nincs (M0)
Alkalmazások
Vastagbél- és végbélrák kutatása; a vastagbél- és végbélrák biológiája; PDx-alapú sejtvonalak kutatása; gyógyszerérzékenység és célzott terápia értékelése; p53/KRAS mutációval rendelkező vastagbél- és végbélrák modellezése; MSS vastagbél- és végbélrák immunológiája; a betegekhez illesztett HROC biobanki vizsgálatok
Szinonimák
  • HROC103

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Kis sejtek kolóniákban
Sejttípus
Epithelialis
Ploidiaállapot
Aneuploid
MSI állapot
MSS
Kettőzési idő
30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HROC103 T0 M1 (Cytion katalógusszám: 300802)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1D10

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
P53 mut, APC mut, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
2 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
3-5 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
Néhány nap
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
44 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi