Pereiti prie turinio
HROC103 T0 M1
Audinys
Kolorektalinis, sukurtas iš PDx (iš paciento gauto ksenografinio transplantato) pirminio CRC audinio (Colon ascendens, TNM stadija T2N1M0R0L0V0, G2 laipsnis, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Regioninių limfmazgių pažeidimas (TNM N1; Lk(n)+2 iš 23 ištirtų); tolimų metastazių nėra (M0)
Sinonimai
HROC103

Dokumentai

HROC103 T0 M1

Cell line · Prekės numeris 300802

This is one of a series of cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from a PDTx (Patient-derived Tumor xenograft) since 2006.

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Tai viena iš ląstelių linijų, kurias nuo 2006 m. iš PDTx (iš paciento gauto naviko ksenografinio transplantato) sukūrė PD Dr. Michaelas Linnebacheris.
Audinys
Kolorektalinis, sukurtas iš PDx (iš paciento gauto ksenografinio transplantato) pirminio CRC audinio (Colon ascendens, TNM stadija T2N1M0R0L0V0, G2 laipsnis, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Regioninių limfmazgių pažeidimas (TNM N1; Lk(n)+2 iš 23 ištirtų); tolimų metastazių nėra (M0)
Paraiškos
Kolorektalinio vėžio tyrimai; kolorektalinio vėžio biologija; tyrimai su PDx pagrįstomis ląstelių linijomis; vaistų jautrumo ir tikslinės terapijos vertinimas; p53/KRAS mutacijų turinčio kolorektalinio vėžio modeliavimas; MSS tipo kolorektalinio vėžio imunologija; tyrimai su pacientams pritaikytais HROC biobanko mėginiais
Sinonimai
  • HROC103

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Mažos ląstelės kolonijose
Ląstelių tipas
Epitelis
Ploidijos būklė
Aneuploidinis
MSI būsena
MSS
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
30 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
HROC103 T0 M1 (Cytion katalogo numeris 300802)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1D10

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
P53 mut, APC mut, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-5 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Kelios dienos
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
44 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių