Přejít na obsah
HROC103 T0 M1
Tkáň
Kolorektální, Vytvořeno z PDx (xenograftu odvozeného od pacienta) primární tkáně CRC (Colon ascendens, TNM stadium T2N1M0R0L0V0, stupeň G2, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Postižení regionálních lymfatických uzlin (TNM N1; Lk(n)+2 z 23 vyšetřených); žádné vzdálené metastázy (M0)
Synonyma
HROC103

Dokumenty

HROC103 T0 M1

Cell line · Číslo výrobku 300802

This is one of a series of cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from a PDTx (Patient-derived Tumor xenograft) since 2006.

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis
Jedná se o jednu ze série buněčných linií, které od roku 2006 vytváří PD Dr. Michael Linnebacher z PDTx (xenotransplantát odvozený od pacienta).
Tkáň
Kolorektální, Vytvořeno z PDx (xenograftu odvozeného od pacienta) primární tkáně CRC (Colon ascendens, TNM stadium T2N1M0R0L0V0, stupeň G2, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Nemoc
Adenokarcinom
Místo metastázy
Postižení regionálních lymfatických uzlin (TNM N1; Lk(n)+2 z 23 vyšetřených); žádné vzdálené metastázy (M0)
Aplikace
Výzkum kolorektálního karcinomu; biologie kolorektálního karcinomu; výzkum buněčných linií odvozených z PDx; hodnocení citlivosti na léky a cílené terapie; modelování kolorektálního karcinomu s mutacemi v genech p53 a KRAS; imunologie kolorektálního karcinomu typu MSS; studie s využitím biobanky HROC přizpůsobené konkrétním pacientům
Synonyma
  • HROC103

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Malé buňky v koloniích
Typ buňky
Epitelové
Ploidní stav
Aneuploidní
Stav MSI
MSS
Doba zdvojnásobení
30 hodin

04Identifikátory

Citace
HROC103 T0 M1 (katalogové číslo Cytion 300802)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1D10

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
P53 mut, APC mut, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
Každých 3 až 5 dní
Zotavení po rozmrazení
Několik dní
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
44 let
Etnická příslušnost
Kavkazský