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HROC103 T0 M1
Pañuelo de papel
Colorrectal, establecido a partir de un PDx (xenoinjerto derivado de paciente) de tejido primario de CCR (Colon ascendens, estadio TNM T2N1M0R0L0V0, grado G2, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Afectación de los ganglios linfáticos regionales (TNM N1; Lk(n)+2 de 23 examinados); sin metástasis a distancia (M0)
Sinónimos
HROC103

Documentos

HROC103 T0 M1

Cell line · Número de producto 300802

This is one of a series of cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from a PDTx (Patient-derived Tumor xenograft) since 2006.

€800.00sin impuestos ni gastos de envío
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Lote
Recomendado (lote más fresco)
1

01Información general

Descripción
Esta es una de una serie de líneas celulares que han sido establecidas por el PD Dr. Michael Linnebacher a partir de un PDTx (xenoinjerto de tumor derivado de paciente) desde 2006.
Pañuelo de papel
Colorrectal, establecido a partir de un PDx (xenoinjerto derivado de paciente) de tejido primario de CCR (Colon ascendens, estadio TNM T2N1M0R0L0V0, grado G2, Lk(n) + 2, ∑ Lk(n) 23).
Enfermedad
Adenocarcinoma
Lugar de metástasis
Afectación de los ganglios linfáticos regionales (TNM N1; Lk(n)+2 de 23 examinados); sin metástasis a distancia (M0)
Aplicaciones
Investigación sobre el cáncer colorrectal; biología del CCR; investigación con líneas celulares derivadas de PDx; evaluación de la sensibilidad a los fármacos y de las terapias dirigidas; modelización del CCR con mutaciones en p53/KRAS; inmunología del CCR MSS; estudios con biobancos de HROC emparejados con pacientes
Sinónimos
  • HROC103

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
Sin OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established from a patient-derived xenograft by PD Dr. Linnebacher
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Células pequeñas en colonias
Tipo de célula
Epitelial
Estado de ploidía
Aneuploide
Estado de MSI
MSS
Tiempo de duplicación
30 horas

04Identificadores

Referencia
HROC103 T0 M1 (número de catálogo de Cytion 300802)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1D10

05Expresión y susceptibilidad

Perfil mutacional
P53 mut, APC mut, K-RasG12VA, N-Raswt, H-Raswt, PIK3CAwt, B-Rafwt

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
2 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
Cada 3 a 5 días
Recuperación tras la descongelación
Pocos días
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
44 años
Origen étnico
Caucásico