SW-620 sejtek – Hatásuk a vastagbélrák kutatására és kísérletezésére

Az SW-620 sejtek a Dukes C stádiumú humán vastagbélrák sejtvonalát alkotják. Magas tumorigenikus és metasztatikus potenciállal rendelkeznek. Ezért széles körben alkalmazzák őket rák- és toxikológiai vizsgálatokban. Ez a cikk az SW-620 vastagbélrák-sejtvonal alapvető jellemzőit tárja fel.

Az SW-620 sejtek eredete és általános jellemzői

A származás és az általános jellemzők a sejtvonalról szóló legfontosabb információk. Ezek előzetes ismerete elengedhetetlen azoknak a kutatóknak, akik fontolóra veszik a sejtvonal bevonását kutatási tanulmányukba. A cikk ezen szakasza a SW-620 sejtvonal legfontosabb jellemzőit és származását ismerteti. Főként a következőket fogja megtudni: Mi az a SW620 sejtvonal? Melyek az SW-620 sejtvonal jellemzői? Mi az SW-620 eredete? Mekkora az SW-640 sejtek mérete? És mi a különbség az SW-620 és az SW-480 között?

• Az SW-620, egy kolorektális karcinóma sejtvonal, egy 51 éves, vastagbél-adenokarcinómában szenvedő kaukázusi férfi mediatizált nyirokcsomó-elváltozásából származik [1]. Ezt a sejtvonalat A. Leibovitz és munkatársai helyezték letétbe.
• Az SW-620 sejtek epiteliális morfológiával rendelkeznek. Kis, kerek, bipoláris sejtekből állnak, amelyek mikrovillusokhoz hasonlítanak.
• Az SW-620 sejtek átmérője 14,4 ± 0,3 μm.
• Ezek a vastagbélráksejtek hiperdiploid kariotípussal rendelkeznek. Az SW-620 sejtek modális kromoszómaszáma 50, amely 45 és 53 között változhat.

SW-480 és SW-620 összehasonlítása

Az SW480 és az SW620 kolorektális rákos sejtvonalak. Az SW-480-at egy primer daganatból nyerték, míg az SW-620-at egy áttétes nyirokcsomóból állították elő. Ezenkívül az ebből a sejtvonalból kialakított xenotranszplantátumok is eltérnek egymástól. Az SW-620-as xenotranszplantátumok tumorsejt-rétegeket képeznek, míg az SW-480-as xenotranszplantátumok mirigyszerű struktúrákat alkotnak [2]. Mindkét sejtvonal mutációs profilja megegyezik.

A vastagbél vagy a végbél vizsgálata során azonosított és eltávolított polip, amelyet a belső nyálkahártyából kiemelkedő húsos kinövés jellemez.

SW-620 sejtek: Tenyésztési információk

A sejtvonal tenyésztésének alapvető fogalmainak megértése elengedhetetlen, mivel ez biztosítja a megfelelő kezelést és fenntartást. Ebben a szakaszban néhány fontos szempontot említünk az SW-620 tenyésztésével kapcsolatban, amelyek segíthetnek a következő kérdések megválaszolásában: Mi az SW-620 táptalaj? Mennyi az SW-620 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztjük az SW-620 sejteket?

A SW-620 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

Duplázódási idő:

Az SW-620 sejtek duplázódási ideje 20 és 26 óra között mozog.

Adherens vagy szuszpenziós:

Az SW-620 sejtvonal adhezív. A sejtek monoréteget képeznek a tenyésztőedény felületén.

Átültetési arány:

Az SW-620 sejteket 1:3 osztási arányban szubkultiválják. A tapadó sejteket magnézium- és kalciummentes foszfátos sóoldattal (1X) öblítik le. Ezután hozzáadják az Accutase átültető oldatot, és a sejteket szobahőmérsékleten 8–10 percig inkubálják. Friss táptalajt adunk hozzá, majd a sejteket centrifugáljuk. Ezután a leszedett sejteket óvatosan újra szuszpendáljuk a növekedési táptalajban, és új lombikokba osztjuk szét a további növekedéshez.

Növekedési tápközeg:

Az SW-620 sejtek ideális növekedéséhez 10% borjúszérummal, 4,5 g/l glükózzal, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM táptalajt használunk. A tápközeget hetente kétszer kell cserélni.

Növekedési feltételek:

Az SW-620 vastagbélrákos sejteket 37 °C hőmérsékletű, 5% CO_₂-tartalmú, párásított inkubátorban tenyésztik.

Tárolás:

Fagyasztás után az SW-620 sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten, ultralow-temperatúra-fagyasztókban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják.

Fagyasztási eljárás és táptalaj:

A CM-1 vagy CM-ACF ideális fagyasztóközeg az SW-620 sejtek számára. Az SW-620 sejtek fagyasztásához lassú fagyasztási eljárást alkalmaznak. Ez percenként csupán 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, így védve a sejtek életképességét.

Felolvasztási folyamat:

A fagyasztott SW-620 sejteket 37 °C-ra előre beállított vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. A felolvasztás után tenyésztőközeget adnak hozzá, majd a sejteket centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztóközeg maradványait. Ezt követően a kapott sejtpelletet újra szuszpendálják tenyésztőközegben, majd a sejteket egy új lombikba öntik tenyésztés céljából.

Biológiai biztonsági szint:

Az SW-620 tenyészetek kezeléséhez 1. szintű biológiai biztonsági (BSL-1) laboratórium szükséges.

SW-620 sejtekből kialakult szferoid fejlődése 10-szeres és 20-szeres nagyításban.

Az SW-620 cellák előnyei

Előnyök

• Vastagbélrák modellezése: Az SW-620 sejtek a vastagbélrák kritikus modelljeként szolgálnak, lehetővé téve a tumor és a metasztázis mechanizmusainak mélyreható tanulmányozását, különösen xenotranszplantációs modellekben.
• Rákkutatás és terápiák: Ezek a sejtek elősegítik a rákbiológia, a kemoterápiás hatékonyság és a sejthalál mechanizmusainak – beleértve az anoikist is – feltárását.
• CD133-expresszió: A CD133-expresszió az SW-620 sejtekben betekintést nyújt a rákos őssejtek biológiájába, valamint annak a tumorogenezisre és a terápiás rezisztenciára gyakorolt hatásába.
• Áramlási citometriai alkalmazások: Ezen sejtek áramlási citometriai elemzése lehetővé teszi a sejtpopulációk, az apoptózis szintje és a proliferáció értékelését.

Az SW-620 sejtvonal kutatási alkalmazásai

Az alábbiakban bemutatjuk azokat a kutatási területeket, ahol az SW-620 sejtek ígéretes alkalmazási lehetőségeket kínálnak:

• Rákkutatás: Az SW-620 felbecsülhetetlen értékű sejtmodell a vastagbélrák biológiájának tanulmányozásához. A kutatók ezt az in vitro modellt használják a ráksejtek növekedését, invázióját és migrációját vezérlő molekuláris mechanizmusok feltárására. Ezenkívül felhasználható az SW620 sejtvonal mutációinak, azaz a p53, APC és KRAS mutációinak vizsgálatára is. Egy 2021-ben végzett kutatás az SW620 sejtvonal KRAS-mutációjának hatását vizsgálta egy új gyógyszer, az FL118 iránti érzékenységre. Megfigyelték, hogy a KRAS túlzott expressziója fokozza az FL118 által kiváltott kolorektális sejtek apoptózisát, míg annak elnémítása csökkenti azt. Ezek az eredmények segíthetnek az FL118 alkalmazásának előrejelzésében KRAS-mutációval rendelkező vastagbélrákos betegek esetében [3].
• Gyógyszerszűrés és -fejlesztés: Az SW-620 sejtvonalat széles körben használják a vastagbélrák elleni potenciális gyógyszerjelöltek szűrésére és tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket használják a gyógyszerek citotoxicitásának és hatékonyságának értékelésére, ami célzott kezelési módszerek kifejlesztéséhez vezethet. Ilyen például egy tanulmány, amely a SW-620 sejtvonal felhasználásával vizsgálta a fahéj és a szegfűszeg egyes illóolaj-összetevőinek vastagbélrák elleni hatását [4].
• Metasztázis-vizsgálatok: Magas metasztatikus potenciáljuknak köszönhetően az SW-620 sejtek felhasználhatók a ráksejtek metasztázisának hátterében álló molekuláris útvonalak feltárására. Például Zhou Yang és munkatársai felfedezték a Grainy-head-like 2 (GRHL2) gén szerepét a vastagbélrák progressziójában és metasztázisában. Felvetették, hogy a GRHL2 gén expressziója az epiteliális-mesenchimális átalakulás (EMT) gátlása révén gátolja a vastagbélrák progresszióját és metasztázisát [5].

Biztosítsa az SW620 sejtvonalat

SW-620 sejtek: Publikációk

Ebben a részben bemutatunk néhány érdekes és leggyakrabban hivatkozott kutatási publikációt az SW-620 sejtekről.

Az ellagitanninok metabolitja, az urolithin A autofágiát indukál és gátolja a metasztázist az emberi SW620 vastagbélrákos sejtekben

A Molecular Carcinogenesis (2017) folyóiratban megjelent tanulmány szerint az urolithin A nevű polifenol kezelés autofágiát indukál az SW620 vastagbélrákos sejtvonalban. Emellett gátolta a ráksejtek metasztázisát is.

A tetrandrin gátolja az emberi vastagbélrákos SW620 sejtek adhézióját, migrációját és invázióját a nukleáris faktor-κB, a mátrix-metalloproteináz-2 és a mátrix-metalloproteináz-9 jelátviteli útvonalak gátlása révén

Az Oncology Letters (2018) folyóiratban megjelent cikk a SW-620 sejtek felhasználásával vizsgálta a tetrandrine – egy bisz-benzil-izokinolin-alkaloid – metasztázisgátló potenciálját.

A CDCA3 a kolorektális rákban az NF-κB/ciklin D1 jelátviteli út aktiválásával elősegíti a sejtek szaporodását

Ez a tanulmány a Biochemical and Biophysical Research Communications (2018) folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt állítja, hogy a CDCA3 (Cell division cycle associated 3) gén expressziója fokozott a kolorektális ráksejtekben, és az NF-κB jelátvitel aktiválása révén elősegíti azok proliferációját.

Az ABL001, egy VEGF-et és DLL4-et célzó bispecifikus antitest, kemoterápiával együtt szinergikusan gátolja a tumor progresszióját xenotranszplantátum-modellekben

Az International Journal of Molecular Sciences (2021) folyóiratban megjelent tanulmány egy bispecifikus antitest (ABL001) és kemoterápiás gyógyszerek szinergikus hatását vizsgálta a tumor progressziójára az SW620 xenotranszplantátumban.

A Bacopa monnieri gyógynövényből nyert tisztított kivonat, a Bacopaside II, in vitro gátolja a vastagbélrákos sejtek növekedését a sejtciklus leállásának és az apoptózis indukálásával

Ez a cikk a Cells (2018) folyóiratban jelent meg. A tanulmányban a Bacopa monnieri-ből nyert Bacopaside II kivonat daganatellenes hatását vizsgálták SW-620 és más vastagbélrákos sejtekben.

Források az SW-620 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok

Az alábbiakban néhány online forrás található, amely az SW-620 vastagbélrákos sejteket mutatja be.

• SW-620 transzfekció: Ez a cikk röviden ismerteti az SW-620 sejtvonal stabil transzfekciójának protokollját.

Az alábbi link az SW-620 sejtkultúra-protokollját tartalmazza.

• SW-620 sejtkultúra-protokoll: Ez a link alapvető információkat nyújt az SW-620 sejtvonalról. Segítséget nyújt továbbá az SW-620 sejtek szubkultiválásának protokolljának elsajátításában, valamint a krioprezervált és proliferáló SW-620 kultúrák kezelésében.
• Sejtkultúra-protokollok: Ez a videó kiváló forrás az adhezív sejtek átültetésére, fagyasztására és felolvasztására vonatkozó protokollok elsajátításához.

Gyakran ismételt kérdések az SW620 cellákról

Hivatkozások

1. Siekmann, W. és munkatársai: A lidokain és a ropivakain hatása az elsődleges (SW480) és a metasztatikus (SW620) vastagbélrákos sejtvonalakra. Oncol Lett, 2019. 18(1): 395–401. o.
2. Hewitt, R.E. és munkatársai: A vastagbélrák progressziójának modelljének validálása. J Pathol, 2000. 192(4): 446–54. o.
3. Thangaiyan, R. és munkatársai: A Kras-mutáció altípusai eltérő módon befolyásolják a kolorektális ráksejtek érzékenységét az FL118-ra, a survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 és MdmX új gátlójára. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): 7458. o.
4. Petrocelli, G. és munkatársai: A növényi illóolajokban jelen lévő molekulák a vastagbélrák (CRC) megelőzésében és kezelésében. Molecules, 2021. 26(4): 885. o.
5. Yang, Z. és munkatársai: A GRHL2 gátolja a kolorektális rák progresszióját és metasztázisát az epiteliális-mezenchimális átalakulás gátlása révén. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): 1195–1205. o.