SW-620-celler – Betydelse för forskning och experiment inom tjocktarmscancer

SW-620-celler utgör den humana kolorektala cancercellinjen i Dukes stadium C. De har hög tumörbildande och metastaserande potential. Därför används de i stor utsträckning i cancer- och toxikologiska studier. Denna artikel kommer att undersöka de grundläggande aspekterna av koloncancercellinjen SW-620.

Ursprung och allmänna egenskaper hos SW-620-cellerna

Ursprung och allmänna egenskaper är den viktigaste informationen om en cellinje. Förkunskaper om detta är avgörande för forskare som överväger att använda den i sin forskning. I detta avsnitt av artikeln förklaras de viktigaste egenskaperna och ursprunget för cellinjen SW-620. Du kommer främst att lära dig följande: Vad är cellinjen SW-620? Vilka egenskaper har cellinjen SW-620? Vad är ursprunget till SW-620? Hur stor är en SW-640-cell? Och vad är skillnaden mellan SW-620 och SW-480?

• SW-620, en cellinje från kolorektal karcinom, härstammar från en medierad lymfkörtellesion hos en 51-årig kaukasisk man med adenokarcinom i tjocktarmen [1]. Denna cellinje deponerades av A Leibovitz och kollegor.
• SW-620-cellerna har en epitelial morfologi. De består också av små runda och bipolära celler som liknar mikrovilli.
• SW-620-cellernas diameter är 14,4 ± 0,3 μm.
• Dessa koloncancerceller har en hyperdiploid karyotyp. Det modala kromosomantalet för SW-620-celler är 50, vilket kan variera mellan 45 och 53.

SW-480 jämfört med SW-620

SW480 och SW620 är kolorektala cancercellinjer. SW-480 härstammar från en primärtumör, medan SW-620 etablerades från en metastaserad lymfkörtel. Dessutom skiljer sig de xenotransplantat som utvecklats från dessa cellinjer från varandra. Xenotransplantat av SW-620 bildar tumörcellskikt, medan xenotransplantat av SW-480 bildar körtelliknande strukturer [2]. Båda cellinjerna har identiska mutationsprofiler.

Polyp som upptäcks och avlägsnas vid undersökning av tjocktarmen eller ändtarmen, kännetecknad av en köttig utväxt från slemhinnan.

SW-620-celler: Information om odling

Det är viktigt att förstå de grundläggande principerna för odling av en cellinje, eftersom det leder till korrekt hantering och underhåll. I detta avsnitt nämns några viktiga punkter för odling av SW-620 som kan hjälpa dig att förstå: Vad är SW-620-mediet? Vad är fördubblingstiden för SW-620? Hur odlar man SW-620-celler?

Viktiga punkter för odling av SW-620-celler

Fördubblingstid:

Fördubblingstiden för SW-620 varierar mellan 20 och 26 timmar.

Adherenta eller i suspension:

Cellinjen SW-620 är vidhäftande. Cellerna bildar monoskikt på ytan av odlingskärlet.

Subkultiveringsförhållande:

SW-620-celler subkultiveras med en delningsförhållande på 1:3. De vidhäftande cellerna sköljs med fosfat-saltlösning (1X) utan magnesium och kalcium. Därefter tillsätts passageringslösningen Accutase, och cellerna inkuberas vid rumstemperatur i 8 till 10 minuter. Färskt odlingsmedium tillsätts och cellerna centrifugeras. Därefter resuspenderas de skördade cellerna försiktigt i odlingsmedium och fördelas i nya kolvar för odling.

Odlingsmedium:

DMEM-medium kompletterat med 10 % fetalt bovint serum, 4,5 g/l glukos, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/l NaHCO₃ och 1,0 mM natriumpyruvat används för optimal tillväxt av SW-620-celler. Mediet bör bytas ut två gånger per vecka.

Odlingsförhållanden:

SW-620-kolonkarcinomceller odlas i en befuktad inkubator vid 37 °C och med 5 % CO₂.

Förvaring:

Efter frysning förvaras SW-620-cellerna vid en temperatur under -150 °C i ultralågtemperaturfrysar eller i gasfasen av flytande kväve.

Frysningsprocess och medium:

CM-1 eller CM-ACF är ett idealiskt frysmedium för SW-620-celler. En långsam frysprocess används för att frysa SW-620-celler. Den tillåter endast en temperatursänkning på 1 °C per minut, vilket skyddar cellernas livskraft.

Upptining:

Frysta SW-620-celler tinas i ett vattenbad som är förinställt på 37 °C i 40 till 60 sekunder. Efter upptining tillsätts odlingsmedium och cellerna centrifugeras för att avlägsna frysmediets beståndsdelar. Därefter resuspenderas den erhållna cellpelleten i ett tillväxtmedium och cellerna hälls över i en ny kolv för odling.

Biosäkerhetsnivå:

Ett laboratorium med biosäkerhetsnivå 1 (BSL-1) krävs för hantering av SW-620-odlingar.

En sfäroid bildad av SW-620-celler i 10x och 20x förstoring.

Fördelar med SW-620-celler

Fördelar

• Modellering av koloncancer: SW-620-celler fungerar som en viktig modell för koloncancer, vilket möjliggör en fördjupad studie av tumör- och metastasmekanismer, särskilt i xenotransplantatmodeller.
• Cancerforskning och behandling: Dessa celler underlättar utforskningen av cancerbiologi, kemoterapins effektivitet och mekanismerna bakom celldöd, inklusive anoikis.
• CD133-uttryck: Uttrycket av CD133 i SW-620-celler ger insikter i cancerstamcellsbiologi och dess betydelse för tumörbildning och behandlingsresistens.
• Tillämpningar inom flödescytometri: Flödescytometrianalys av dessa celler möjliggör bedömning av cellpopulationer, apoptosnivåer och proliferation.

Forskningsanvändningar av SW-620-cellinjen

Nedan beskrivs de forskningsområden där SW-620-celler har lovande användningsområden:

• Cancerforskning: SW-620 är en ovärderlig cellmodell för att studera biologin bakom kolorektal cancer. Forskare använder denna in vitro-modell för att utforska de molekylära mekanismer som driver cancercellernas tillväxt, invasion och migration. Dessutom kan den användas för att studera mutationer i SW620-cellinjen, t.ex. p53, APC och KRAS. I en studie från 2021 undersöktes effekten av KRAS-mutationen i SW620-cellinjen på känsligheten för det nya läkemedlet FL118. Man observerade att överuttryck av KRAS ökar den FL118-inducerade apoptosen hos kolorektala celler, medan inaktivering av genen minskar den. Dessa resultat kan bidra till att förutsäga användningen av FL118 hos patienter med kolonkarcinom som bär på en KRAS-mutation [3].
• Läkemedelsscreening och utveckling: Cellinjen SW-620 används i stor utsträckning för att screena och testa potentiella läkemedelskandidater mot koloncancer. Forskare använder dessa celler för att utvärdera läkemedels cytotoxicitet och effekt, vilket kan leda till utvecklingen av riktade behandlingsmetoder. I en studie undersöktes exempelvis de kolorektalcancerhämmande egenskaperna hos enskilda eteriska oljekomponenter från kanel och kryddnejlika med hjälp av cellinjen SW-620 [4].
• Studier av metastasering: På grund av sin höga metastaseringspotential kan SW-620-celler användas för att undersöka de molekylära signalvägar som ligger till grund för cancercellernas metastasering. Zhou Yang och hans kollegor upptäckte till exempel vilken roll genen Grainy-head-like 2 (GRHL2) spelar i koloncancerns progression och metastasering. De föreslog att uttrycket av GRHL2-genen hämmar kolorektal cancers progression och metastasering genom att undertrycka epitel-till-mesenkym-övergången (EMT) [5].

Säkra din SW620-cellinje

SW-620-celler: Publikationer

I detta avsnitt kommer vi att lyfta fram några intressanta och ofta citerade forskningspublikationer om SW-620-cellerna.

Urolithin A, en metabolit av ellagitanniner, inducerar autofagi och hämmar metastasering i humana SW620-kolorektalcancerceller

Denna studie, publicerad i Molecular Carcinogenesis (2017), föreslog att behandlingen med polyfenolen urolitin A inducerar autofagi i kolorektalcancercellinjen SW620. Den hämmade även cancercellernas metastasering.

Tetrandrin hämmar vidhäftning, migration och invasion av humana SW620-celler från koloncancer genom hämning av signalvägarna för nukleär faktor-κB, matrixmetalloproteinas-2 och matrixmetalloproteinas-9

Denna artikel i Oncology Letters (2018) undersökte den antimetastatiska potentialen hos tetrandrin, en bis-bensylisokinolinalkaloid, med hjälp av SW-620-celler.

CDCA3 främjar cellproliferation genom att aktivera NF-κB/cyklin D1-signalvägen vid kolorektal cancer

Denna artikel är publicerad i Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Den föreslår att CDCA3-genen (Cell division cycle associated 3) är uppreglerad i kolorektala cancerceller och främjar deras proliferation genom att aktivera NF-κB-signalvägen.

ABL001, en bispecifik antikropp riktad mot VEGF och DLL4, hämmar i kombination med kemoterapi tumörprogression i xenotransplantatmodeller på ett synergistiskt sätt

En studie i International Journal of Molecular Sciences (2021) undersökte den synergistiska effekten av en bispecifik antikropp (ABL001) och kemoterapeutiska läkemedel på tumörprogression i SW620-xenotransplantat.

Det renade extraktet från medicinalväxten Bacopa monnieri, Bacopaside II, hämmar tillväxten av koloncancerceller in vitro genom att framkalla cellcykelstopp och apoptos

Denna artikel är publicerad i tidskriften Cells (2018). Här undersöktes Bacopa monnieri-extraktet, Bacopaside II, med avseende på dess antitumöraktivitet i SW-620-celler och andra kolorektala cancerceller.

Resurser för cellinjen SW-620: protokoll, videor och mer

Nedan följer några online-resurser som handlar om SW-620-koloncarcinomcellerna.

• Transfektion av SW-620: Denna artikel beskriver kortfattat protokollet för stabil transfektion av cellinjen SW-620.

Följande länk innehåller odlingsprotokollet för SW-620-celler.

• Protokoll för SW-620-cellodling: Denna länk ger grundläggande information om SW-620-cellinjen. Den hjälper dig också att lära dig protokollet för subkultivering av SW-620-celler och hantering av kryokonserverade och prolifererande SW-620-odlingar.
• Protokoll för cellodling: Denna video är en utmärkt källa för att lära sig protokoll för subkultivering, frysning och upptining av adherenta celler.

Vanliga frågor om SW620-celler

Referenser

1. Siekmann, W., et al., Effekt av lidokain och ropivakain på primära (SW480) och metastatiska (SW620) koloncancercellinjer. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
2. Hewitt, R.E., et al., Validering av en modell för koloncancerprogression. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
3. Thangaiyan, R., et al., Subtyper av Kras-mutationer påverkar på olika sätt kolorektalcancercellernas känslighet för FL118, en ny hämmare av survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 och MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
4. Petrocelli, G., m.fl., Molekyler som förekommer i eteriska oljor från växter för förebyggande och behandling av kolorektal cancer (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
5. Yang, Z., et al., GRHL2 hämmar utvecklingen och metastaseringen av kolorektalcancer genom att hämma den epitel-mesenkymala övergången. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.