Buňky SW-620 – vliv na výzkum a experimenty v oblasti rakoviny tlustého střeva

Buňky SW-620 představují lidskou buněčnou linii kolorektálního karcinomu ve stadiu C podle Dukese. Vyznačují se vysokým tumorigenním a metastatickým potenciálem. Proto jsou široce využívány ve studiích zaměřených na rakovinu a toxikologii. Tento článek se bude zabývat základními aspekty buněčné linie rakoviny tlustého střeva SW-620.

Původ a obecné charakteristiky buněk SW-620

Původ a obecné charakteristiky představují základní informace o buněčné linii. Předchozí znalost těchto údajů je nezbytná pro výzkumníky, kteří uvažují o jejím využití ve svém výzkumném projektu. Tato část článku vysvětlí klíčové vlastnosti a původ buněčné linie SW-620. Dozvíte se zejména: Co je buněčná linie SW-620? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie SW-620? Jaký je původ buněčné linie SW-620? Jaká je velikost buněk SW-640? A jaký je rozdíl mezi buněčnými liniemi SW-620 a SW-480?

• SW-620, buněčná linie kolorektálního karcinomu, pochází z mediátizované léze lymfatické uzliny u 51letého muže kavkazského původu s adenokarcinomem tlustého střeva [1]. Tuto buněčnou linii uložili A. Leibovitz a jeho kolegové.
• Buňky SW-620 mají epiteliální morfologii. Skládají se také z malých kulatých a bipolárních buněk, které odpovídají mikrovilím.
• Velikost buněk SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm v průměru.
• Tyto buňky rakoviny tlustého střeva mají hyperdiploidní karyotyp. Modální počet chromozomů u buněk SW-620 je 50, přičemž se může pohybovat v rozmezí od 45 do 53.

SW-480 vs. SW-620

SW480 a SW620 jsou buněčné linie kolorektálního karcinomu. SW-480 byla odvozena z primárního nádoru, zatímco SW-620 byla založena z metastázované lymfatické uzliny. Navíc se xenotransplantáty vyvinuté z těchto buněčných linií od sebe liší. Xenotransplantáty SW-620 vytvářejí vrstvy nádorových buněk, zatímco xenotransplantáty SW-480 tvoří žlázovité struktury [2]. Obě buněčné linie mají identické mutační profily.

Polyp zjištěný a odstraněný při vyšetření tlustého střeva nebo konečníku, charakterizovaný masitým výrůstkem z vnitřní výstelky.

Buňky SW-620: Informace o kultivaci

Porozumění základním principům kultivace buněčné linie je nezbytné, protože vede k jejímu správnému zacházení a udržování. V této části jsou uvedeny některé klíčové body pro kultivaci buněk SW-620, které vám pomohou zjistit: Co je to médium pro SW-620? Jaká je doba zdvojnásobení buněk SW-620? Jak se kultivují buňky SW-620?

Klíčové body pro kultivaci buněk SW-620

Doba zdvojnásobení:

Doba zdvojnásobení buněk SW-620 se pohybuje v rozmezí 20 až 26 hodin.

Adherentní nebo v suspenzi:

Buněčná linie SW-620 je adhezivní. Buňky tvoří monovrstvy na povrchu kultivační nádoby.

Poměr subkultivace:

Buňky SW-620 se subkultivují v poměru 1:3. Adherentní buňky se propláchnou fosfátovým solným pufrem (1X) bez hořčíku a vápníku. Následně se přidá pasážovací roztok Accutase a buňky se inkubují při pokojové teplotě po dobu 8 až 10 minut. Přidá se čerstvé médium a buňky se odstředí. Poté se sklizené buňky opatrně resuspendují v růstovém médiu a rozdělí se do nových lahví pro růst.

Růstové médium:

Pro ideální růst buněk SW-620 se používá médium DMEM doplněné 10 % fetálním bovinním sérem, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO₃ a 1,0 mM pyruvátu sodného. Média by se měla vyměňovat dvakrát týdně.

Podmínky kultivace:

Buňky karcinomu tlustého střeva SW-620 se kultivují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s 5 % CO_₂.

Skladování:

Po zmrazení se buňky SW-620 skladují při teplotě pod -150 °C v mrazničkách s extrémně nízkou teplotou nebo v plynné fázi kapalného dusíku.

Proces zmrazení a médium:

CM-1 nebo CM-ACF je ideální médium pro zmrazení buněk SW-620. K zmrazení buněk SW-620 se používá postup pomalého zmrazování. Ten umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, čímž chrání životaschopnost buněk.

Proces rozmrazování:

Zmrazené buňky SW-620 se rozmrazují ve vodní lázni předem nastavené na 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Po rozmrazení se přidá kultivační médium a buňky se odstředí, aby se odstranily zbytky mrazicího média. Poté se získaný buněčný pelet resuspenduje v růstovém médiu a buňky se přelijí do nové baňky pro růst.

Úroveň biologické bezpečnosti:

Pro práci s kulturami SW-620 je nutná laboratoř úrovně biologické bezpečnosti 1 (BSL-1).

Vyvíjející se sféroid vytvořený z buněk SW-620 při 10násobném a 20násobném zvětšení.

Výhody článků SW-620

Výhody

• Modelování karcinomu tlustého střeva: Buňky SW-620 slouží jako klíčový model pro karcinom tlustého střeva a umožňují podrobné studium mechanismů nádorů a metastáz, zejména v modelech xenotransplantátů.
• Výzkum rakoviny a terapie: Tyto buňky usnadňují zkoumání biologie rakoviny, účinnosti chemoterapie a mechanismů buněčné smrti, včetně anoikis.
• Exprese CD133: Exprese CD133 v buňkách SW-620 poskytuje vhled do biologie rakovinných kmenových buněk a jejích dopadů na tumorigenezi a rezistenci vůči léčbě.
• Aplikace průtokové cytometrie: Analýza těchto buněk pomocí průtokové cytometrie umožňuje posouzení buněčných populací, úrovní apoptózy a proliferace.

Výzkumné aplikace buněčné linie SW-620

Níže jsou popsány oblasti výzkumu, ve kterých se buňky SW-620 jeví jako slibné:

• Výzkum rakoviny: SW-620 je neocenitelný buněčný model pro studium biologie kolorektálního karcinomu. Vědci tento in vitro model využívají k prozkoumání molekulárních mechanismů řídících růst, invazi a migraci rakovinných buněk. Kromě toho lze tento model využít ke studiu mutací v buněčné linii SW620, tj. p53, APC a KRAS. Výzkum provedený v roce 2021 zkoumal vliv mutace genu KRAS v buněčné linii SW620 na citlivost nového léčiva FL118. Bylo zjištěno, že nadměrná exprese genu KRAS zvyšuje FL118-indukovanou apoptózu kolorektálních buněk, zatímco jeho potlačení ji snižuje. Tyto výsledky mohou pomoci předpovědět použití FL118 u pacientů s karcinomem tlustého střeva s mutací v genu KRAS [3].
• Screening a vývoj léčiv: Buněčná linie SW-620 se široce používá ke screeningu a testování potenciálních kandidátů na léky proti rakovině tlustého střeva. Výzkumníci tyto buňky využívají k hodnocení cytotoxicity a účinnosti léčiv, což může vést k vývoji cílených léčebných přístupů. Například jedna studie zkoumala protikolorektální protinádorové účinky jednotlivých složek éterických olejů ze skořice a hřebíčku s využitím buněčné linie SW-620 [4].
• Studie metastázování: Vzhledem k vysokému metastatickému potenciálu lze buňky SW-620 použít k výzkumu molekulárních drah, které jsou základem metastázování rakovinných buněk. Například Zhou Yang a jeho kolegové zjistili úlohu genu Grainy-head-like 2 (GRHL2) v progresi a metastázování rakoviny tlustého střeva. Navrhli, že exprese genu GRHL2 inhibuje progresi a metastázování kolorektálního karcinomu prostřednictvím potlačení epiteliálně-mezenchymální transformace (EMT) [5].

Zabezpečte svou buněčnou linii SW620

Články o článcích SW-620

V této sekci se podíváme na některé zajímavé a nejčastěji citované vědecké publikace týkající se buněk SW-620.

Metabolit ellagitanninů, urolithin A, indukuje autofagii a inhibuje metastázy v lidských buňkách kolorektálního karcinomu SW620

Tato studie publikovaná v časopise Molecular Carcinogenesis (2017) navrhla, že léčba polyfenolem urolithinem A indukuje autofagii v buněčné linii kolorektálního karcinomu SW620. Rovněž potlačila metastázy rakovinných buněk.

Tetrandrin potlačuje adhezi, migraci a invazi lidských buněk rakoviny tlustého střeva SW620 prostřednictvím inhibice signálních drah jaderného faktoru-κB, matrixové metaloproteinázy-2 a matrixové metaloproteinázy-9

Tento článek v časopise Oncology Letters (2018) zkoumal antimetastatický potenciál tetrandrin, alkaloidu z skupiny bis-benzylisochinolinu, na buněčné linii SW-620.

CDCA3 podporuje buněčnou proliferaci aktivací signální dráhy NF-κB/cyklin D1 u kolorektálního karcinomu

Tento článek byl publikován v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Navrhuje, že gen CDCA3 (Cell division cycle associated 3) je v buňkách kolorektálního karcinomu nadměrně exprimován a podporuje jejich proliferaci prostřednictvím aktivace signální dráhy NF-κB.

ABL001, bispecifická protilátka namířená proti VEGF a DLL4, v kombinaci s chemoterapií synergicky inhibuje progresi nádoru v modelech xenotransplantátů

Studie publikovaná v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) zkoumala synergický účinek bispecifické protilátky (ABL001) a chemoterapeutických léků na progresi nádoru v xenotransplantátu SW620.

Čištěný extrakt z léčivé rostliny Bacopa monnieri, bacopasid II, inhibuje růst buněk rakoviny tlustého střeva in vitro tím, že indukuje zastavení buněčného cyklu a apoptózu

Tento článek byl publikován v časopise Cells (2018). V této studii byl extrakt z Bacopa monnieri, Bacopasid II, zkoumán z hlediska protinádorových účinků na buněčnou linii SW-620 a další buňky kolorektálního karcinomu.

Zdroje pro buněčnou linii SW-620: protokoly, videa a další

Níže uvádíme několik online zdrojů věnovaných buňkám karcinomu tlustého střeva SW-620.

• Transfekce buněk SW-620: Tento článek stručně popisuje protokol pro stabilní transfekci buněčné linie SW-620.

Následující odkaz obsahuje protokol pro kultivaci buněk SW-620.

• Protokol pro kultivaci buněk SW-620: Tento odkaz poskytuje základní informace o buněčné linii SW-620. Pomůže vám také seznámit se s protokolem pro subkultivaci buněk SW-620 a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferujícími kulturami SW-620.
• Protokoly pro kultivaci buněk: Toto video je skvělým zdrojem informací o protokolech pro pasážování adhezivních buněk, jejich zmrazování a rozmrazování.

Často kladené otázky o buňkách SW620

Literatura

1. Siekmann, W., et al., Vliv lidokainu a ropivakainu na primární (SW480) a metastatické (SW620) buněčné linie rakoviny tlustého střeva. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395–401.
2. Hewitt, R.E. a kol., Validace modelu progrese rakoviny tlustého střeva. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446–54.
3. Thangaiyan, R., a kol., Podtypy mutací genu KRAS výrazně ovlivňují citlivost buněk kolorektálního karcinomu na FL118, nový inhibitor survivinu, Mcl-1, XIAP, cIAP2 a MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
4. Petrocelli, G., a kol., Molekuly přítomné v éterických olejích rostlin pro prevenci a léčbu kolorektálního karcinomu (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
5. Yang, Z., a kol., GRHL2 inhibuje progresi a metastázy kolorektálního karcinomu potlačením epiteliálně-mezenchymální transformace. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195–1205.