Cellule SW-620 - Impatto sulla ricerca e sulla sperimentazione sul cancro del colon

Le cellule SW-620 costituiscono la linea cellulare del cancro colorettale umano in stadio C di Dukes. Possiedono un elevato potenziale tumorigenico e metastatico. Pertanto, sono ampiamente impiegate negli studi sul cancro e in tossicologia. Questo articolo esplorerà gli aspetti fondamentali della linea cellulare del cancro al colon SW-620.

Origine e caratteristiche generali delle cellule SW-620

L’origine e le caratteristiche generali sono le informazioni fondamentali su una linea cellulare. Conoscerle in anticipo è essenziale per i ricercatori che intendono utilizzarla nei propri studi. Questa sezione dell’articolo illustrerà le caratteristiche principali e l’origine della linea cellulare SW-620. In particolare, imparerete: Che cos’è la linea cellulare SW-620? Quali sono le caratteristiche della linea cellulare SW-620? Qual è l’origine della linea cellulare SW-620? Qual è la dimensione delle cellule SW-640? E qual è la differenza tra SW-620 e SW-480?

• La SW-620, una linea cellulare di carcinoma colorettale, ha avuto origine da una lesione linfonodale metastatizzata di un uomo caucasico di 51 anni affetto da adenocarcinoma del colon [1]. Questa linea cellulare è stata depositata da A. Leibovitz e colleghi.
• Le cellule SW-620 presentano una morfologia epiteliale. Sono costituite da piccole cellule rotonde e bipolari che corrispondono ai microvilli.
• Le cellule SW-620 hanno un diametro di 14,4 ± 0,3 μm.
• Queste cellule di carcinoma del colon presentano un cariotipo iperdiploide. Il numero modale di cromosomi per le cellule SW-620 è 50, che può variare da 45 a 53.

SW-480 vs SW-620

SW-480 e SW-620 sono linee cellulari di carcinoma colorettale. La linea SW-480 è stata derivata da un tumore primario, mentre la linea SW-620 è stata ottenuta da un linfonodo metastatizzato. Inoltre, gli xenotrapianti sviluppati da queste linee cellulari presentano caratteristiche diverse. Gli xenotrapianti di SW-620 producono strati di cellule tumorali, mentre quelli di SW-480 formano strutture simili a ghiandole [2]. Entrambe le linee cellulari presentano profili di mutazione identici.

Polipo individuato e rimosso durante un esame del colon o del retto, caratterizzato da una protuberanza carnosa che sporge dal rivestimento interno.

Cellule SW-620: Informazioni sulla coltura

Comprendere i concetti di base relativi alla coltura di una linea cellulare è fondamentale, poiché ciò consente una gestione e una manutenzione adeguate. In questa sezione vengono menzionati alcuni punti chiave per la coltura delle cellule SW-620 che possono aiutarti a capire: Qual è il terreno di coltura delle cellule SW-620? Qual è il tempo di raddoppio delle cellule SW-620? Come si coltivano le cellule SW-620?

Punti chiave per la coltura delle cellule SW-620

Tempo di raddoppio:

Il tempo di raddoppio delle cellule SW-620 varia da 20 a 26 ore.

Aderenzi o in sospensione:

La linea cellulare SW-620 è aderente. Le cellule formano monostrati sulla superficie del recipiente di coltura.

Rapporto di subcoltura:

Le cellule SW-620 vengono sottoposte a subcoltura con un rapporto di divisione di 1:3. Le cellule aderenti vengono risciacquate con tampone salino fosfato (1X) privo di magnesio e calcio. Successivamente, viene aggiunta la soluzione di passaggio, Accutase, e le cellule vengono incubate a temperatura ambiente per 8-10 minuti. Si aggiunge terreno fresco e le cellule vengono centrifugate. Successivamente, le cellule raccolte vengono accuratamente risospese in un terreno di crescita e trasferite in nuove fiasche per la proliferazione.

Terreno di crescita:

Per la crescita ottimale delle cellule SW-620 si utilizza un terreno DMEM integrato con siero fetale bovino al 10%, 4,5 g/L di glucosio, 4 mM di L-glutammina, 1,5 g/L di NaHCO₃ e 1,0 mM di piruvato di sodio. Il terreno di coltura deve essere rinnovato due volte alla settimana.

Condizioni di coltura:

Le cellule di carcinoma del colon SW-620 vengono coltivate in un incubatore umidificato a una temperatura di 37 °C e con il 5% _di CO_₂.

Conservazione:

Dopo il congelamento, le cellule SW-620 vengono conservate a temperature inferiori a -150 °C in congelatori a temperatura ultra-bassa o nella fase vapore dell’azoto liquido.

Processo di congelamento e mezzo:

Il CM-1 o il CM-ACF sono terreni di congelamento ideali per le cellule SW-620. Per congelare le cellule SW-620 si utilizza un processo di congelamento lento, che consente un abbassamento della temperatura di soli 1 °C al minuto, proteggendo così la vitalità cellulare.

Processo di scongelamento:

Le cellule SW-620 congelate vengono scongelate in un bagno d’acqua preimpostato a 37 °C per 40-60 secondi. Dopo lo scongelamento, si aggiunge il terreno di coltura e le cellule vengono centrifugate per rimuovere i residui del mezzo di congelamento. Successivamente, il pellet cellulare ottenuto viene risospeso in un terreno di crescita e le cellule vengono trasferite in una nuova fiasca per la coltura.

Livello di biosicurezza:

Per la manipolazione delle colture di SW-620 è necessario un laboratorio di livello di biosicurezza 1 (BSL-1).

Sfere in fase di sviluppo formate da cellule SW-620, con ingrandimento 10x e 20x.

Vantaggi delle celle SW-620

Vantaggi

• Modellizzazione del carcinoma del colon: le cellule SW-620 costituiscono un modello fondamentale per il carcinoma del colon, consentendo uno studio approfondito dei meccanismi tumorali e metastatici, in particolare nei modelli di xenotrapianto.
• Ricerca oncologica e terapie: queste cellule facilitano l’esplorazione della biologia del cancro, dell’efficacia chemioterapica e dei meccanismi di morte cellulare, compresa l’anoikis.
• Espressione di CD133: l’espressione di CD133 nelle cellule SW-620 fornisce approfondimenti sulla biologia delle cellule staminali tumorali e sulle sue implicazioni per la tumorigenesi e la resistenza alla terapia.
• Applicazioni della citometria a flusso: L’analisi mediante citometria a flusso su queste cellule consente la valutazione delle popolazioni cellulari, dei livelli di apoptosi e della proliferazione.

Applicazioni di ricerca della linea cellulare SW-620

Di seguito vengono illustrate le aree di ricerca in cui le cellule SW-620 trovano un impiego promettente:

• Ricerca sul cancro: la linea cellulare SW-620 è un modello cellulare di inestimabile valore per lo studio della biologia del cancro del colon-retto. I ricercatori utilizzano questo modello in vitro per esplorare i meccanismi molecolari che guidano la crescita, l’invasione e la migrazione delle cellule tumorali. Inoltre, può essere utilizzata per studiare le mutazioni della linea cellulare SW620, ovvero p53, APC e KRAS. Una ricerca condotta nel 2021 ha esaminato l’effetto della mutazione del gene KRAS nella linea cellulare SW620 sulla sensibilità a un nuovo farmaco, l’FL118. È stato osservato che la sovraespressione di KRAS aumenta l’apoptosi delle cellule colorettali indotta da FL118, mentre il suo silenziamento la riduce. Questi risultati potrebbero aiutare a prevedere l’uso di FL118 nei pazienti affetti da carcinoma del colon con mutazione del gene KRAS [3].
• Screening e sviluppo di farmaci: la linea cellulare SW-620 è ampiamente utilizzata per lo screening e la sperimentazione di potenziali candidati farmaci contro il cancro del colon. I ricercatori utilizzano queste cellule per valutare la citotossicità e l’efficacia dei farmaci, il che può portare allo sviluppo di approcci terapeutici mirati. Ad esempio, uno studio ha esplorato le attività antitumorali contro il cancro del colon-retto di singoli composti di oli essenziali di cannella e chiodi di garofano utilizzando la linea cellulare SW-620 [4].
• Studi sulle metastasi: a causa dell’elevato potenziale metastatico, le cellule SW-620 possono essere utilizzate per studiare i percorsi molecolari alla base delle metastasi delle cellule tumorali. Ad esempio, Zhou Yang e i suoi colleghi hanno individuato il ruolo del gene Grainy-head-like 2 (GRHL2) nella progressione e nella metastasi del cancro del colon. Hanno ipotizzato che l’espressione del gene GRHL2 inibisca la progressione e la metastasi del cancro colorettale attraverso la soppressione della transizione epiteliale-mesenchimale (EMT) [5].

Proteggi la tua linea cellulare SW620

Cellule SW-620: Pubblicazioni

Questa sezione illustrerà alcune pubblicazioni di ricerca interessanti e tra le più citate sulle cellule SW-620.

L'urolitina A, un metabolita degli ellagitannini, induce l'autofagia e inibisce le metastasi nelle cellule tumorali colorettali umane SW620

Questo studio, pubblicato su *Molecular Carcinogenesis* (2017), ha suggerito che il trattamento con l’urolitina A, un polifenolo, induca l’autofagia nella linea cellulare SW620 del carcinoma colorettale. Inoltre, ha inibito la metastasi delle cellule tumorali.

La tetrandrina sopprime l’adesione, la migrazione e l’invasione delle cellule SW620 del cancro del colon umano attraverso l’inibizione delle vie di segnalazione del fattore nucleare-κB, della metalloproteinasi-2 della matrice e della metalloproteinasi-9 della matrice

Questo articolo pubblicato su Oncology Letters (2018) ha esplorato il potenziale antimetastatico della tetrandrina, un alcaloide bis-benzilisochinolinico, utilizzando le cellule SW-620.

Il gene CDCA3 promuove la proliferazione cellulare attivando la via di segnalazione NF-κB/ciclina D1 nel carcinoma colorettale

Questo articolo è stato pubblicato su *Biochemical and Biophysical Research Communications* (2018). Esso ha suggerito che il gene CDCA3 (Cell division cycle associated 3) sia sovraregolato nelle cellule del carcinoma colorettale e ne promuova la proliferazione attraverso l’attivazione della segnalazione NF-κB.

ABL001, un anticorpo bispecifico diretto contro VEGF e DLL4, in combinazione con la chemioterapia, inibisce sinergicamente la progressione tumorale nei modelli di xenotrapianto

Lo studio pubblicato su *International Journal of Molecular Sciences* (2021) ha esaminato l’effetto sinergico di un anticorpo bispecifico (ABL001) e di farmaci chemioterapici sulla progressione tumorale nello xenotrapianto SW620.

L’estratto purificato della pianta medicinale Bacopa monnieri, il bacopaside II, inibisce la crescita delle cellule tumorali del colon in vitro inducendo l’arresto del ciclo cellulare e l’apoptosi

Questo articolo è stato pubblicato su *Cells* (2018). In questo studio, l’estratto di Bacopa monnieri, il bacopaside II, è stato analizzato per le sue attività antitumorali nelle cellule SW-620 e in altre cellule tumorali del colon-retto.

Risorse per la linea cellulare SW-620: protocolli, video e altro

Di seguito sono riportate alcune risorse online relative alle cellule di carcinoma del colon SW-620.

• Trasfezione delle cellule SW-620: questo articolo descrive brevemente il protocollo per la trasfezione stabile della linea cellulare SW-620.

Il link seguente contiene il protocollo di coltura cellulare della linea SW-620.

• Protocollo di coltura cellulare SW-620: questo link fornisce informazioni di base sulla linea cellulare SW-620. Vi aiuterà inoltre ad apprendere il protocollo per il ripasso delle cellule SW-620 e la gestione delle colture SW-620 crioconservate e in proliferazione.
• Protocolli di coltura cellulare: questo video è un'ottima risorsa per apprendere i protocolli di passaggio, congelamento e scongelamento delle cellule aderenti.

Domande frequenti sulle celle SW620

Riferimenti

1. Siekmann, W., et al., Effetto della lidocaina e della ropivacaina sulle linee cellulari di carcinoma del colon primario (SW480) e metastatico (SW620). Oncol Lett, 2019. 18(1): pagg. 395-401.
2. Hewitt, R.E., et al., Convalida di un modello di progressione del carcinoma del colon. J Pathol, 2000. 192(4): pp. 446-54.
3. Thangaiyan, R., et al., I sottotipi di mutazione Kras influenzano in modo distinto la sensibilità delle cellule tumorali del colon-retto a FL118, un nuovo inibitore di survivina, Mcl-1, XIAP, cIAP2 e MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
4. Petrocelli, G., et al., Molecole presenti negli oli essenziali vegetali per la prevenzione e il trattamento del cancro del colon-retto (CRC). Molecules, 2021. 26(4): p. 885.
5. Yang, Z., et al., GRHL2 inibisce la progressione e le metastasi del cancro del colon-retto sopprimendo la transizione epiteliale-mesenchimale. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.