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Cellule HL-60
Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia promielocitica acuta
Sinonimi
HL 60, HL.60, HL60

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Cellule HL-60

Cell line · Codice prodotto 300209

Le cellule HL-60, provenienti da una donna di 36 anni affetta da leucemia promielocitica acuta, costituiscono un modello fondamentale nella ricerca sul cancro, in particolare nello studio di ...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule HL-60, provenienti da una donna di 36 anni affetta da leucemia promielocitica acuta, rappresentano un modello fondamentale per la ricerca sul cancro, in particolare per lo studio delle neoplasie ematologiche, grazie alla loro capacità di differenziarsi in globuli bianchi maturi e di mimare le risposte immunitarie innate, favorendo la comprensione della progressione leucemica, l'espressione degli oncogeni cellulari e l'identificazione di bersagli terapeutici.

La capacità delle cellule HL-60 di differenziarsi in globuli bianchi maturi, come granulociti e monociti, attraverso agenti come il dimetilsolfossido (DMSO) o l'acido retinoico, sottolinea la loro importanza negli studi relativi al differenziamento delle cellule mieloidi umane e fa luce sui meccanismi alla base della progressione leucemica e sull'efficacia degli interventi terapeutici.

Le cellule di leucemia mieloide umana HL-60 sono parte integrante della ricerca sull'apoptosi, l'attivazione cellulare e il ciclo cellulare, compresa la regolazione di oncogeni chiave come il proto-oncogene c-myc e il fattore di necrosi tumorale (TNF-alfa). La loro capacità di formare trappole extracellulari, strutture coinvolte nella cattura e nell'uccisione di agenti patogeni, che rispecchia la risposta immunitaria innata osservata nei neutrofili primari, rende le cellule HL-60 un modello utile per studiare gli aspetti immunitari della leucemia e il modo in cui le cellule leucemiche interagiscono con il sistema immunitario.

Inoltre, la reattività delle cellule HL-60 alle vie di segnalazione, come la via MAPK e varie chinasi, è cruciale per la dissezione dei meccanismi molecolari che guidano la proliferazione e la differenziazione delle cellule leucemiche. Questo aspetto è particolarmente vantaggioso per l'identificazione di bersagli terapeutici e lo sviluppo di nuove strategie di trattamento della leucemia.

Le cellule HL-60 sono una risorsa fondamentale nella ricerca sul cancro, in quanto offrono approfondimenti sulle neoplasie ematologiche, sulla progressione leucemica e sui potenziali bersagli terapeutici grazie alle loro capacità di differenziazione uniche e al mimetismo delle risposte immunitarie.

Tessuto
Sangue
Malattia
Leucemia promielocitica acuta
Applicazioni
Ospite di trasfezione
Sinonimi
  • HL 60
  • HL.60
  • HL60

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfoblasto

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HL-60 (numero di catalogo Cytion 300209)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0002

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Complemento, Fc
Isoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D,1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1
Oncogeni
Myc+
Trascriptasi inversa
Negativo
Prodotti
Il fattore di necrosi tumorale (TNF), noto anche come fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-alfa, TNF alfa), dopo la stimolazione con l'acido forbol-miristico

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
2 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
36 anni
Etnia
Caucasico