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RenCa-IL2
Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma
Sinonimi
RENCA-IL-2

Documenti

RenCa-IL2

Cell line · Codice prodotto 400322

RenCa-IL2 è una variante geneticamente modificata della linea cellulare RenCa, una linea cellulare derivata da un adenocarcinoma renale murino. Questa particolare modifica riguarda lo sta...

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01Informazioni generali

Descrizione

RenCa-IL2 è una variante geneticamente modificata della linea cellulare RenCa, una linea cellulare di adenocarcinoma renale murino. Questa particolare modifica prevede la trasfezione stabile del gene che codifica per l'interleuchina-2 (IL-2), una citochina cruciale nella regolazione dei globuli bianchi, fondamentali per il sistema immunitario. Il gene IL-2 è stato introdotto nelle cellule RenCa per studiare gli effetti dell'espressione dell'IL-2 sulla crescita tumorale, sul reclutamento delle cellule immunitarie e sull'efficacia delle strategie immunoterapiche in un contesto sperimentale controllato.

Originariamente derivate da un carcinoma renale trovato in topi Balb/c, le cellule RenCa sono utilizzate per esplorare l'immunologia del cancro e gli approcci terapeutici, in particolare per capire come i tumori eludono il sistema immunitario e come queste difese possono essere contrastate. L'introduzione dell'IL-2 nelle cellule RenCa facilita la ricerca sul ruolo di questa citochina nel modulare il microambiente tumorale, potenzialmente migliorando il reclutamento e l'attivazione delle cellule T e delle cellule natural killer (NK) nel sito del tumore. Ciò è particolarmente significativo nel contesto dello sviluppo di immunoterapie antitumorali più efficaci.

Gli studi condotti sulla linea cellulare RenCa-IL2 possono fornire preziose indicazioni sui meccanismi attraverso i quali l'IL-2 può promuovere le risposte immunitarie antitumorali, fungendo così da modello per la valutazione di nuovi trattamenti antitumorali che utilizzano le citochine per stimolare la risposta immunitaria. Inoltre, la linea cellulare RenCa-IL2 è utile per valutare le dinamiche di interazione delle cellule immunitarie all'interno del milieu tumorale, fornendo un valido strumento per la sperimentazione preclinica della rilevanza biologica e del potenziale terapeutico.

Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma
Sinonimi
  • RENCA-IL-2

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This murine renal carcinoma cell line contains an IL-2 expression construct introduced by transfection, leading to stable interleukin-2 production for studying IL-2-driven immune responses in tumor models. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi singenici

04Identificatori

Riferimento bibliografico
RenCa-IL2 (numero di catalogo Cytion 400322)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5944

05Espressione e suscettibilità

Prodotti
IL-2

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
BALB/c
Età dei donatori
6 settimane