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RenCa-IL2
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
RENCA-IL-2

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RenCa-IL2

Cell line · Número do produto 400322

A RenCa-IL2 é uma variante geneticamente modificada da linha celular RenCa, uma linha celular de adenocarcinoma renal murino. Esta modificação específica envolve a sta...

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01Informações gerais

Descrição

RenCa-IL2 é uma variante geneticamente modificada da linha celular RenCa, uma linha celular de adenocarcinoma renal murino. Esta modificação específica envolve a transfecção estável do gene que codifica a interleucina-2 (IL-2), uma citocina crítica na regulação dos glóbulos brancos que são cruciais para o sistema imunitário. O gene IL-2 foi introduzido nas células RenCa para estudar os efeitos da expressão da IL-2 no crescimento do tumor, no recrutamento de células imunitárias e na eficácia das estratégias imunoterapêuticas num contexto experimental controlado.

Originalmente derivadas de um carcinoma renal encontrado em ratinhos Balb/c, as células RenCa são utilizadas para explorar a imunologia do cancro e as abordagens terapêuticas, em particular para compreender como os tumores evitam o sistema imunitário e como estas defesas podem ser contrariadas. A introdução de IL-2 nas células RenCa facilita a investigação do papel desta citocina na modulação do microambiente tumoral, aumentando potencialmente o recrutamento e a ativação das células T e das células natural killer (NK) no local do tumor. Isto é particularmente importante no contexto do desenvolvimento de imunoterapias mais eficazes contra o cancro.

Os estudos que utilizam a linha celular RenCa-IL2 podem contribuir com informações valiosas sobre os mecanismos através dos quais a IL-2 pode promover respostas imunitárias anti-tumorais, servindo assim de modelo para a avaliação de novos tratamentos contra o cancro que utilizam citocinas para estimular a resposta imunitária. Além disso, a linha celular RenCa-IL2 é útil para avaliar a dinâmica da interação das células imunitárias no meio tumoral, constituindo uma ferramenta valiosa para testes pré-clínicos de relevância biológica e potencial terapêutico.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
  • RENCA-IL-2

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This murine renal carcinoma cell line contains an IL-2 expression construct introduced by transfection, leading to stable interleukin-2 production for studying IL-2-driven immune responses in tumor models. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos singénicos

04Identificadores

Referência
RenCa-IL2 (número de catálogo Cytion 400322)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5944

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
IL-2

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
6 semanas