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Calu-3
Tessuto
Adenocarcinoma polmonare
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
CaLu-3, CALU-3, Calu 3, Calu3, CALU3

Documenti

Calu-3

Cell line · Codice prodotto 305032

Calu-3 cells are a human epithelial cell line derived from the lung adenocarcinoma of a 25-year-old in 1975. These cells exhibit epithelial morphology and...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule Calu-3 sono una linea cellulare epiteliale umana derivata dall'adenocarcinoma polmonare di un venticinquenne nel 1975. Queste cellule presentano una morfologia epiteliale e sono caratterizzate dalla capacità di formare giunzioni strette, desmosomi e microvilli, rispecchiando le caratteristiche strutturali dell'epitelio polmonare. Le cellule Calu 3 sono particolarmente note per la loro elevata secrezione di mucine, glicoproteine coinvolte nella protezione e nella lubrificazione delle vie aeree polmonari, che le rende un modello in vitro rilevante per lo studio della biologia dell'epitelio delle vie aeree, compresa la produzione, la secrezione e la regolazione delle mucine.

Le cellule di adenocarcinoma polmonare umano Calu-3 sono utilizzate per la scoperta e lo sviluppo di farmaci, in particolare per valutare l'assorbimento, la distribuzione, il metabolismo e l'escrezione (ADME) dei farmaci inalati. La loro capacità di formare un monostrato polarizzato quando vengono coltivate su supporti permeabili le rende adatte allo studio del trasporto dei farmaci e dei loro effetti sull'epitelio delle vie aeree.

Le cellule Calu 3, derivate da tipi di cellule tumorali polmonari umane, sono particolarmente importanti per lo studio delle cellule epiteliali delle vie aeree e del loro ruolo nelle condizioni respiratorie. Queste cellule provengono da ghiandole sottomucose bronchiali e sono utilizzate in modelli di coltura cellulare per imitare le vie aeree umane, fornendo approfondimenti sulla funzione respiratoria, sulle lesioni delle cellule epiteliali, sulle lesioni polmonari e sullo studio di malattie come la fibrosi cistica o la SARS.

Lo studio delle cellule Calu 3 e della loro risposta agli agenti chemioterapici contribuisce al più ampio campo della ricerca sul cancro del polmone, offrendo approfondimenti sull'efficacia dei trattamenti e sul potenziale di sviluppo di strategie terapeutiche più efficaci.

Tessuto
Adenocarcinoma polmonare
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sito metastatico
Versamento pleurico
Sinonimi
  • CaLu-3
  • CALU-3
  • Calu 3
  • Calu3
  • CALU3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Calu-3 (numero di catalogo Cytion 305032)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0609

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Gruppo sanguigno A, Rh+
Espressione dell'antigene
Espressione dell'antigene: Gruppo sanguigno A, Rh+

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
25 anni