NCI-H1299

La linea cellulare NCI-H1299, nota anche come H1299, è una linea cellulare derivata da un carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) umano, ottenuta da una metastasi linfonodale proveniente da un paziente maschio adulto affetto da carcinoma polmonare. Insieme alle cellule H292, la linea H1299 è ampiamente utilizzata come modello di NSCLC nella ricerca in materia di biologia del cancro e immuno-oncologia. La linea cellulare presenta una morfologia di tipo epiteliale caratterizzata da cellule aderenti e appiattite con uno spessore inferiore a 5 µm e un tempo di raddoppio approssimativo di 22-30 ore. Le cellule H1299 esprimono cheratina e vimentina, ma sono negative per la proteina tripletta dei neurofilamenti, riflettendo un fenotipo con caratteristiche sia epiteliali che mesenchimali.

Dal punto di vista genetico, le cellule H1299 presentano una delezione parziale omozigote nel gene TP53, con conseguente perdita completa dell'espressione della proteina p53. La linea è inoltre caratterizzata dallo stato KRAS wild-type, che la distingue da altri modelli di NSCLC come le cellule A549, che presentano mutazioni endogene del gene KRAS. A causa dell'assenza di una segnalazione p53 funzionale, combinata con un KRAS intatto, le cellule H1299 sono frequentemente utilizzate per studiare la biologia dei soppressori tumorali, le vie di segnalazione oncogeniche, l'apoptosi, le metastasi e i meccanismi di resistenza terapeutica. Rispetto a linee cellulari di NSCLC più epiteliali come l'A549, le cellule H1299 mostrano un fenotipo più mesenchimale con ridotta espressione dei marcatori epiteliali, rendendole particolarmente utili per le indagini sulla transizione epiteliale-mesenchimale (EMT), l'invasione e la progressione metastatica.

È stato inoltre riportato che le cellule H1299 sintetizzano il neuropeptide neuromedina B (NMB) a livelli bassi, mentre non producono gastrin-releasing peptide (GRP) rilevabile. Le loro caratteristiche di crescita robusta, l'elevata trasfettabilità e il background molecolare ben caratterizzato hanno contribuito al loro ampio utilizzo in studi riguardanti terapie mirate, editing genetico, citotossicità immuno-mediata e vie di segnalazione a valle associate a KRAS. Come per tutti i modelli di cellule tumorali coltivate a lungo termine, si raccomanda l'autenticazione periodica e la conferma delle caratteristiche molecolari chiave per garantire la riproducibilità sperimentale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia