NCI-H1299

NCI-H1299 หรือที่รู้จักในชื่อ H1299 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์ขนาดเล็ก (NSCLC) ของมนุษย์ ซึ่งถูกสร้างขึ้นจากการแพร่กระจายของต่อมน้ำเหลืองที่มาจากผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่เป็นมะเร็งปอดชนิดคาร์ซิโนมา นอกจากเซลล์ H292 แล้ว H1299 ยังถูกใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลอง NSCLC ในการวิจัยชีววิทยาของมะเร็งและภูมิคุ้มกันมะเร็ง เซลล์ไลน์แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว โดยมีลักษณะเป็นเซลล์ติดแน่น แบนราบ มีความหนาไม่เกิน 5 ไมโครเมตร และมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 22–30 ชั่วโมง เซลล์ H1299 แสดงการแสดงออกของเคราตินและวีเมนติน แต่ให้ผลลบต่อโปรตีน neurofilament triplet ซึ่งสะท้อนถึงฟีโนไทป์ที่มีลักษณะทั้งของเยื่อบุผิวและเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน

ในทางพันธุกรรม เซลล์ H1299 มีลักษณะการกลายพันธุ์แบบโฮโมไซกัสของการลบบางส่วนในยีน TP53 ส่งผลให้เกิดการสูญเสียการแสดงออกของโปรตีน p53 อย่างสมบูรณ์ เซลล์ไลน์นี้ยังมีลักษณะเด่นคือมีสถานะ KRAS แบบปกติ ซึ่งแตกต่างจากโมเดล NSCLC อื่นๆ เช่น เซลล์ A549 ที่มีการกลายพันธุ์ของ KRAS ภายในเซลล์เอง เนื่องจากการขาดการทำงานของสัญญาณ p53 ร่วมกับ KRAS ที่สมบูรณ์ เซลล์ H1299 จึงมักถูกนำมาใช้ในการศึกษาชีววิทยาของยีนกดการเกิดเนื้องอก เส้นทางสัญญาณก่อมะเร็ง การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส การแพร่กระจาย และการดื้อต่อยา เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ไลน์ของ NSCLC ที่มีลักษณะเป็นเยื่อบุมากกว่า เช่น A549 เซลล์ H1299 แสดงลักษณะของเซลล์ที่มีลักษณะเป็นเยื่อบุและเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (mesenchymal phenotype) มากกว่า โดยมีระดับการแสดงออกของเครื่องหมายเยื่อบุลดลง ทำให้เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงจากเยื่อบุไปเป็นเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (epithelial-to-mesenchymal transition: EMT) การรุกราน และการแพร่กระจายของมะเร็ง

มีรายงานว่าเซลล์ H1299 สามารถสังเคราะห์นิวโรเปปไทด์ นิวโรเมดิน บี (NMB) ในระดับต่ำได้ ในขณะที่ขาดการผลิตเปปไทด์ที่ปล่อยแกสตริน (GRP) ที่ตรวจพบได้ ลักษณะการเจริญเติบโตที่แข็งแกร่ง ความสามารถในการถ่ายโอนยีนสูง และพื้นฐานทางโมเลกุลที่ได้รับการอธิบายอย่างดีของเซลล์เหล่านี้มีส่วนสนับสนุนการใช้งานอย่างกว้างขวางในการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการบำบัดแบบมุ่งเป้า การแก้ไขยีน ความเป็นพิษของเซลล์ที่เกิดจากภูมิคุ้มกัน และเส้นทางสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับ KRAS ในระดับต่อไป เช่นเดียวกับแบบจำลองเซลล์เนื้องอกที่เพาะเลี้ยงในระยะยาวทั้งหมด แนะนำให้มีการตรวจสอบและยืนยันลักษณะโมเลกุลที่สำคัญเป็นระยะ เพื่อให้มั่นใจในความสามารถในการทำซ้ำของการทดลอง

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.