.jpg)
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งเซลล์ใหญ่ของปอด
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
- Synonyms
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Documents
NCI-H460
Cell line · Product number 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Customization / Recommendations
- NCI-H460Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- NCI-H460 หรือที่รู้จักในชื่อ H460 ถูกแยกมาจากผู้ป่วยชายที่เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์ใหญ่ เซลล์ NCI-H460 เป็นเซลล์ที่เกาะติดและเจริญเติบโตเร็วกว่าเซลล์ A549 ถึงสองเท่า โดยมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า 33 ชั่วโมงใน RPMI 1640 ที่เสริมด้วย FBS 10% สามารถสร้างเนื้องอกได้ทั้งในแบบ in vitro และ in vivo รวมถึงในหนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice)เซลล์ NCI-H460 แสดงการแสดงออกของ p53 mRNA ในระดับสูงเทียบเท่ากับเนื้อเยื่อปอดปกติ ในขณะที่ไม่แสดงความผิดปกติของโครงสร้างดีเอ็นเอในระดับมหภาค เซลล์เหล่านี้ย้อมติดสีบวกสำหรับเคราตินและวีเมนติน แต่ย้อมติดสีลบสำหรับโปรตีนนิวโรฟิลลาเมนต์ไตรเพล็ต การวิเคราะห์ไอโซเอนไซม์แสดงให้เห็นว่า HPRT อยู่บนพื้นผิวของเซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็กเหล่านี้ไอโซเอนไซม์ AK-1, ES-D และ Me-2 แสดงออกในระดับ 1 ในขณะที่ไอโซเอนไซม์ G6PD และ PGM1 และ PGM3 แสดงออกในระดับ B และ 1-2 ตามลำดับ เซลล์มีโครโมโซมแบบไฮโปไตรพลอยด์ โดยมีจำนวนโครโมโซมแบบโมดอล 57 ตัว ซึ่งอยู่ในช่วง 53 ถึง 65 ตัวโครโมโซมที่มีเครื่องหมายเจ็ดตัวพบได้ทั่วไปในเซลล์ทุกชนิด รวมถึง der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22) ระดับการแสดงออกของ p53 mRNA ที่สูงทำให้พวกมันเป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาเชิงกลไกโมเลกุลของมะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งเซลล์ใหญ่ของปอด
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
- Synonyms
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่
04Identifiers
- Citation
- H-460 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305020)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Ethnicity
- ยุโรป
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
.jpg)
