.jpg)
- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Velikocelični karcinom pljuč
- Mesto metastaze
- Plevralni izliv
- Sinonimi
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Dokumenti
NCI-H460
Cell line · Številka izdelka 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Prilagajanje / Priporočila
- NCI-H460Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- NCI-H460, znan tudi kot H460, je bil pridobljen iz moškega bolnika z velikoceličnim pljučnim karcinomom. Celice NCI-H460 so adherentne celice, ki rastejo dvakrat hitreje kot celice A549, njihov čas podvojitve pa je 33 ur v RPMI 1640, dopolnjenem z 10 % FBS. Na modelih in vitro in in vivo, vključno z golimi mišmi, lahko tvorijo tumorje. Pokazalo se je, da celice NCI-H460 izražajo mRNA p53 na visoki ravni, primerljivi z normalnim pljučnim tkivom, pri čemer ne kažejo nobenih grobih strukturnih nepravilnosti DNK. Pozitivno se obarvajo za keratin in vimentin, vendar so negativne za nevrofilamentni tripletni protein. Izoencimska analiza je pokazala, da je HPRT lokaliziran na površini teh celičnih linij nedrobnoceličnega pljučnega raka. Izoencimi AK-1, ES-D in Me-2 so izraženi na ravni 1, medtem ko so izoencimi G6PD ter PGM1 in PGM3 izraženi na ravni B oziroma 1-2. Celice imajo hipotriploidni kariotip z modalnim številom kromosomov 57, ki se giblje med 53 in 65. Sedem označevalnih kromosomov je skupnih vsem celicam, vključno z der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). Zaradi visoke ravni izražanja mRNA p53 so primerne za preučevanje molekularnih mehanizmov nedrobnoceličnega pljučnega raka.
- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Velikocelični karcinom pljuč
- Mesto metastaze
- Plevralni izliv
- Sinonimi
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijski
- Tumorigeničen
- Da
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- H-460 (kataloška številka Cytion 305020)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Etnična pripadnost
- Evropski
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)
.jpg)
