Preskoči na vsebino
NCI-H196
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom pljuč
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumenti

NCI-H196

Cell line · Številka izdelka 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

NCI-H196 je celična linija drobnoceličnega pljučnega raka (SCLC), ki se uporablja za preučevanje mehanizmov napredovanja raka, odpornosti na kemoterapijo in odzivov celic na oksidativni stres. Raziskave, ki so vključevale NCI-H196, so pokazale njeno občutljivost na citotoksične učinke pirolidin ditiokarbamata (PDTC), ki je prooksidativno sredstvo. PDTC povzroči zastoj celičnega cikla v fazi S in znatno zmanjša sposobnost preživetja celic NCI-H196 v odvisnosti od odmerka. Ta citotoksičnost je posledica indukcije oksidativnega stresa, ki se kaže v povečanju reaktivnih kisikovih zvrsti (ROS) in spremembah izražanja genov, povezanih z oksidativnim stresom. Dodatek antioksidantov, kot je N-acetil-L-cistein (NAC), lahko učinkovito obrne citotoksičnost, povzročeno s PDTC, kar potrjuje vlogo oksidativnega stresa pri celični smrti.

Nadaljnje študije so pokazale, da PDTC povečuje citotoksičnost cisplatina, kemoterapevtskega zdravila prvega izbora, ki se uporablja za zdravljenje SCLC. Kombinacija nizkih odmerkov cisplatina z netoksičnimi koncentracijami PDTC povzroči sinergistično citotoksičnost v celicah NCI-H196. Ta kombinirana terapija naj bi bila učinkovita zaradi zmanjšanja regulacije ATP7A, transporterja bakrovega odtoka, ki je povezan z odpornostjo na cisplatin, ki jo povzroča PDTC. Z zaviranjem ATP7A lahko PDTC poveča količino znotrajceličnega bakra in poveča občutljivost celic NCI-H196 na cisplatin, kar poudarja njegov potencial kot dodatnega zdravljenja SCLC.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Drobnocelični karcinom pljuč
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Uporaba
3D celična kultura, raziskave raka
Sinonimi
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
NCI-H196 (kataloška številka Cytion 300390)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

06Donator

Starost darovalca
68 let
Etnična pripadnost
Evropski