Prejsť na obsah
NCI-H196
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm pľúc
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumenty

NCI-H196

Cell line · Číslo výrobku 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

NCI-H196 je bunková línia malobunkového karcinómu pľúc (SCLC), ktorá sa používa na štúdium mechanizmov progresie rakoviny, rezistencie na chemoterapiu a reakcií buniek na oxidačný stres. Výskum s NCI-H196 preukázal jej citlivosť na cytotoxické účinky pyrolidín ditiokarbamátu (PDTC), prooxidačného činidla. PDTC vyvoláva zastavenie bunkového cyklu vo fáze S a výrazne znižuje životaschopnosť buniek NCI-H196 v závislosti od dávky. Táto cytotoxicita sa pripisuje indukcii oxidačného stresu, o čom svedčí zvýšený výskyt reaktívnych foriem kyslíka (ROS) a zmeny v expresii génov súvisiacich s oxidačným stresom. Pridanie antioxidantov, ako je N-acetyl-L-cysteín (NAC), môže účinne zvrátiť cytotoxicitu vyvolanú PDTC, čo potvrdzuje úlohu oxidačného stresu pri bunkovej smrti.

Ďalšie štúdie ukázali, že PDTC zvyšuje cytotoxicitu cisplatiny, chemoterapeutika prvej línie používaného na liečbu SCLC. Kombinácia nízkych dávok cisplatiny s netoxickými koncentráciami PDTC vedie k synergickej cytotoxicite v bunkách NCI-H196. Predpokladá sa, že táto kombinovaná liečba je účinná vďaka zníženiu regulácie ATP7A, transportéra efluxu medi spojeného s rezistenciou na cisplatinu, ktorú spôsobuje PDTC. Inhibíciou ATP7A môže PDTC zvýšiť intracelulárnu meď a senzibilizovať bunky NCI-H196 na cisplatinu, čo zvýrazňuje jeho potenciál ako doplnkovej terapie SCLC.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm pľúc
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Aplikácie
3D bunkové kultúry, výskum rakoviny
Synonymá
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citácia
NCI-H196 (katalógové číslo Cytion 300390)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

06Darca

Vek darcu
68 rokov
Etnická príslušnosť
Európska