Gå direkte til indholdet
NCI-H196
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet lungekarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Synonymer
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumenter

NCI-H196

Cell line · Varenummer 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

NCI-H196 er en cellelinje med småcellet lungekræft (SCLC), der bruges til at undersøge mekanismerne for kræftprogression, kemoterapiresistens og cellulære reaktioner på oxidativ stress. Forskning med NCI-H196 har vist, at den er følsom over for de cytotoksiske virkninger af pyrrolidindithiocarbamat (PDTC), som er et pro-oxidant middel. PDTC inducerer cellecyklusstop i S-fasen og reducerer levedygtigheden af NCI-H196-celler betydeligt på en dosisafhængig måde. Denne cytotoksicitet tilskrives induktion af oxidativ stress, hvilket fremgår af øgede reaktive oxygenarter (ROS) og ændringer i udtrykket af oxidativ stress-relaterede gener. Tilsætning af antioxidanter som N-acetyl-L-cystein (NAC) kan effektivt vende den PDTC-inducerede cytotoksicitet, hvilket bekræfter den rolle, som oxidativt stress spiller i celledød.

Yderligere undersøgelser har vist, at PDTC forstærker cytotoksiciteten af cisplatin, et førsteklasses kemoterapimiddel, der bruges til behandling af SCLC. Kombination af lave doser cisplatin med ikke-toksiske koncentrationer af PDTC fører til synergistisk cytotoksicitet i NCI-H196-celler. Denne kombinationsbehandling menes at være effektiv på grund af PDTC's nedregulering af ATP7A, en kobberudstrømningstransportør, der er forbundet med cisplatinresistens. Ved at hæmme ATP7A kan PDTC øge det intracellulære kobber og gøre NCI-H196-cellerne følsomme over for cisplatin, hvilket fremhæver dets potentiale som en supplerende behandling af SCLC.

Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet lungekarcinom
Metastasested
Pleural effusion
Anvendelser
3D-cellekultur, Kræftforskning
Synonymer
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H196 (Cytion katalognummer 300390)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

06Donor

Donorens alder
68 år
Etnisk tilhørsforhold
Europæisk