.jpg)
- Væv
- Binyrerne
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- NCI-H295R, NCI H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1
Dokumenter
NCI-H295R
Cell line · Varenummer 300483
H295R was adapted from the NCI-H295 pluripotent adrenocortical carcinoma cell line established by A.F. Gazdar and associates (1990) from a carcinoma of the a...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCI-H295RCell line€650.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
- H295R blev tilpasset fra den pluripotente NCI-H295 binyrebark-karcinomcellelinje, der blev etableret af A.F. Gazdar og medarbejdere (1990) fra et karcinom i binyrebarken. De oprindelige celler blev tilpasset til et dyrkningsmedium, som reducerede populationsfordoblingstiden fra 5 dage til 2 dage. De tilpassede celler blev udvalgt til at vokse i et monolag i modsætning til de oprindelige celler, som voksede i suspension. Denne cellelinje bevarer evnen til at producere binyreandrogener. Den reagerer på angiotensin II og kaliumioner.
- Væv
- Binyrerne
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- NCI-H295R
- NCI H295R
- NCIH295R
- H-295R
- H295R-S1
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCI-H295R (Cytion katalognummer 300483)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0458
05Udtryk og modtagelighed
- Produkter
- Aldosteron, kortisol, C19-steroider
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- Du kan købe vores færdige NCI-H295R-cellevækstmedium (820402) eller vælge at supplere DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-artikelnummer 820400a) med nedenstående tilsætningsstoffer
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Tilsæt mediet 5 % FBS, 0,00625 mg/mL insulin, 0,00625 mg/mL transferrin, 6,25 ng/mL selen, 1,25 mg/mL bovint serumalbumin, 0,00535 mg/mL linolsyre
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- 48 timer
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 48 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Kaukasisk
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja
.jpg)
.jpg)
