Μετάβαση στο περιεχόμενο
NCI-H295R
Ιστός
Επινεφρίδιος αδένας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Συνώνυμα
NCI-H295R, NCI H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1

Έγγραφα

NCI-H295R

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300483

H295R was adapted from the NCI-H295 pluripotent adrenocortical carcinoma cell line established by A.F. Gazdar and associates (1990) from a carcinoma of the a...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Το H295R προσαρμόστηκε από την πολυδύναμη κυτταρική σειρά καρκινώματος του φλοιού των επινεφριδίων NCI-H295 που δημιουργήθηκε από τον A.F. Gazdar και τους συνεργάτες του (1990) από καρκίνωμα του φλοιού των επινεφριδίων. Τα αρχικά κύτταρα προσαρμόστηκαν σε μέσο καλλιέργειας που μείωσε το χρόνο διπλασιασμού του πληθυσμού από 5 ημέρες σε 2 ημέρες. Τα προσαρμοσμένα κύτταρα επιλέχθηκαν να αναπτύσσονται σε μονοστρωματική μορφή, σε αντίθεση με τα αρχικά κύτταρα που αναπτύσσονταν σε εναιώρημα. Αυτή η κυτταρική σειρά διατηρεί την ικανότητα παραγωγής επινεφριδιακών ανδρογόνων. Ανταποκρίνεται στην αγγειοτενσίνη ΙΙ και στα ιόντα καλίου.
Ιστός
Επινεφρίδιος αδένας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Συνώνυμα
  • NCI-H295R
  • NCI H295R
  • NCIH295R
  • H-295R
  • H295R-S1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NCI-H295R (αριθμός καταλόγου Cytion 300483)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0458

05Έκφραση και ευαισθησία

Προϊόντα
Αλδοστερόνη, κορτιζόλη, στεροειδή C19

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Μπορείτε να αγοράσετε το έτοιμο προς χρήση μέσο ανάπτυξης κυττάρων NCI-H295R (820402) ή να επιλέξετε να συμπληρώσετε το DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a) με τα παρακάτω πρόσθετα
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 5% FBS, 0,00625 mg/mL ινσουλίνης, 0,00625 mg/mL τρανσφερρίνης, 6,25 ng/mL σεληνίου, 1,25 mg/mL αλβουμίνης ορού βοοειδών, 0,00535 mg/mL λινολεϊκού οξέος
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
48 ώρες
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
48 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος

Ίσως χρειαστείτε επίσης