.jpg)
- Tkáň
- Nadledvinky
- Nemoc
- Karcinom
- Synonyma
- NCI-H295R, NCI H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1
Dokumenty
NCI-H295R
Cell line · Číslo výrobku 300483
H295R was adapted from the NCI-H295 pluripotent adrenocortical carcinoma cell line established by A.F. Gazdar and associates (1990) from a carcinoma of the a...
Přizpůsobení / Doporučení
- NCI-H295RCell line€650.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
- H295R byla upravena z buněčné linie pluripotentního adrenokortikálního karcinomu NCI-H295, kterou vytvořil A. F. Gazdar a spolupracovníci (1990) z karcinomu kůry nadledvin. Původní buňky byly upraveny na kultivační médium, které zkrátilo dobu zdvojení populace z 5 dnů na 2 dny. Upravené buňky byly vybrány tak, aby rostly v monovrstvě, na rozdíl od původních buněk, které rostly v suspenzi. Tato buněčná linie si zachovává schopnost produkovat nadledvinové androgeny. Je citlivá na angiotenzin II a draselné ionty.
- Tkáň
- Nadledvinky
- Nemoc
- Karcinom
- Synonyma
- NCI-H295R
- NCI H295R
- NCIH295R
- H-295R
- H295R-S1
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
04Identifikátory
- Citace
- NCI-H295R (katalogové číslo Cytion 300483)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0458
05Exprese a náchylnost
- Produkty
- Aldosteron, kortizol, C19 steroidy
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- Můžete si zakoupit naše médium pro růst buněk NCI-H295R připravené k použití (820402) nebo si zvolit doplnění DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a) s níže uvedenými přísadami
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 5 % FBS, 0,00625 mg/ml inzulínu, 0,00625 mg/ml transferinu, 6,25 ng/ml selenu, 1,25 mg/ml hovězího sérového albuminu, 0,00535 mg/ml kyseliny linolové
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
- 48 hodin
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 48 let
- Etnická příslušnost
- Kavkazský
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano


.jpg)



.jpg)

