NCI-H1975

Buněčná linie NCI-H1975 je dobře zavedený model odvozený od lidského nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC), konkrétně adenokarcinomu. Tato buněčná linie je zvláště významná díky svým duálním mutacím v genu pro receptor epidermálního růstového faktoru (EGFR). Je nositelem aktivační mutace L858R v exonu 21 a mutace T790M v exonu 20, která způsobuje rezistenci k inhibitorům tyrozinkinázy (TKI) první generace, jako jsou gefitinib a erlotinib. Díky těmto genetickým vlastnostem je NCI-H1975 cenným nástrojem pro studium mechanismů rezistence na léky a testování inhibitorů EGFR nové generace.

Mutace T790M mění ATP-vazebnou kapsu EGFR, čímž snižuje účinnost dřívějších inhibitorů EGFR při zachování signální aktivity receptoru. Tato vlastnost vedla k výzkumu inhibitorů třetí generace, jako je osimertinib, které selektivně cílí na mutantní EGFR T790M a zároveň šetří EGFR divokého typu, čímž snižují účinky mimo cíl. Studie využívající NCI-H1975 přispěly k pochopení strukturálních a funkčních dopadů těchto mutací na signální dráhy zprostředkované EGFR, včetně následných účinků na dráhy PI3K/AKT a RAS/RAF/MEK/ERK, které jsou klíčové pro proliferaci a přežití nádorových buněk.

Kromě své role ve výzkumu rezistence k lékům se NCI-H1975 používá v předklinických hodnoceních kombinovaných terapií, jejichž cílem je překonat rezistenci zacílením na více drah. Jeho dobře charakterizovaný genetický a molekulární profil, včetně podrobných údajů o změnách v počtu kopií a mutační krajině, upevnil jeho postavení jako základního modelu při studiu biologie NSCLC a vývoji léčby.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení