NCI-H1975

Die NCI-H1975-Zelllinie ist ein gut etabliertes Modell, das vom menschlichen nicht-kleinzelligen Lungenkarzinom (NSCLC), insbesondere dem Adenokarzinom, abgeleitet ist. Diese Zelllinie ist aufgrund ihrer doppelten Mutationen im Gen für den epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) von besonderer Bedeutung. Sie trägt die aktivierende Mutation L858R in Exon 21 und die Mutation T790M in Exon 20, die eine Resistenz gegen Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKI) der ersten Generation wie Gefitinib und Erlotinib verleiht. Diese genetischen Merkmale machen NCI-H1975 zu einem wertvollen Instrument für die Untersuchung von Arzneimittelresistenzmechanismen und die Erprobung von EGFR-Inhibitoren der nächsten Generation.

Die T790M-Mutation verändert die ATP-Bindungstasche des EGFR, wodurch die Wirksamkeit früherer EGFR-Inhibitoren verringert wird, während die Signalaktivität des Rezeptors erhalten bleibt. Diese Eigenschaft hat die Forschung an Hemmstoffen der dritten Generation, wie Osimertinib, vorangetrieben, die selektiv auf die T790M-Mutation des EGFR abzielen, während der Wildtyp-EGFR verschont bleibt, wodurch Off-Target-Effekte reduziert werden. Studien mit NCI-H1975 haben dazu beigetragen, die strukturellen und funktionellen Auswirkungen dieser Mutationen auf EGFR-vermittelte Signalwege zu verstehen, einschließlich nachgeschalteter Effekte auf PI3K/AKT- und RAS/RAF/MEK/ERK-Signalwege, die für die Vermehrung und das Überleben von Tumorzellen entscheidend sind.

Neben seiner Rolle in der Arzneimittelresistenzforschung wird NCI-H1975 in präklinischen Untersuchungen von Kombinationstherapien eingesetzt, die darauf abzielen, die Resistenz zu überwinden, indem sie auf mehrere Signalwege abzielen. Sein gut charakterisiertes genetisches und molekulares Profil, einschließlich detaillierter Daten zu Kopienzahlvariationen und Mutationslandschaften, hat seinen Status als wichtiges Modell für die Untersuchung der Biologie des NSCLC und die Entwicklung von Therapien gefestigt.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung