NCI-H1975

NCI-H1975細胞株は、ヒト非小細胞肺癌（NSCLC）、特に腺癌に由来するよく確立されたモデルである。この細胞株は上皮成長因子受容体（EGFR）遺伝子に二重の変異を持つことから特に重要である。エクソン21のL858R活性化変異とエクソン20のT790M変異を有し、ゲフィチニブやエルロチニブなどの第一世代チロシンキナーゼ阻害剤（TKI）に耐性を示す。これらの遺伝的特徴により、NCI-H1975は薬剤耐性メカニズムを研究し、次世代EGFR阻害剤を試験するための貴重なツールとなっている。

T790M変異はEGFRのATP結合ポケットを変化させ、受容体シグナル伝達活性を維持しながら初期のEGFR阻害剤の有効性を低下させる。この特性により、野生型EGFRを温存しながらT790M変異EGFRを選択的に標的とし、オフターゲット効果を減少させるオシメルチニブなどの第三世代阻害剤の研究が推進された。NCI-H1975を用いた研究は、腫瘍細胞の増殖と生存に極めて重要なPI3K/AKTおよびRAS/RAF/MEK/ERK経路に対する下流の影響を含む、EGFRを介するシグナル伝達経路に対するこれらの変異の構造的および機能的影響の理解に貢献している。

薬剤耐性研究での役割に加え、NCI-H1975は複数の経路を標的とすることで耐性を克服することを目的とした併用療法の前臨床評価に使用されている。コピー数の変異や突然変異のランドスケープに関する詳細なデータを含む、その特徴的な遺伝学的・分子生物学的プロフィールは、NSCLCの生物学的研究および治療法開発において不可欠なモデルとしての地位を確固たるものにしている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。