NCI-H1975

La línea celular NCI-H1975 es un modelo bien establecido derivado del carcinoma pulmonar de células no pequeñas (NSCLC) humano, específicamente del adenocarcinoma. Esta línea celular es particularmente importante debido a sus dos mutaciones en el gen del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Presenta la mutación activadora L858R en el exón 21 y la mutación T790M en el exón 20, lo que le confiere resistencia a los inhibidores de la tirosina quinasa (ITQ) de primera generación, como el gefitinib y el erlotinib. Estas características genéticas convierten a la NCI-H1975 en una herramienta valiosa para estudiar los mecanismos de resistencia a los fármacos y evaluar los inhibidores del EGFR de próxima generación.

La mutación T790M altera el bolsillo de unión al ATP del EGFR, lo que reduce la eficacia de los inhibidores del EGFR anteriores al tiempo que mantiene la actividad de señalización del receptor. Esta propiedad ha impulsado la investigación de inhibidores de tercera generación, como el osimertinib, que se dirigen selectivamente al EGFR mutante T790M sin afectar al EGFR de tipo salvaje, lo que reduce los efectos fuera del objetivo. Los estudios que utilizan NCI-H1975 han contribuido a comprender los impactos estructurales y funcionales de estas mutaciones en las vías de señalización mediadas por el EGFR, incluidos los efectos posteriores en las vías PI3K/AKT y RAS/RAF/MEK/ERK, que son fundamentales para la proliferación y supervivencia de las células tumorales.

Además de su papel en la investigación sobre la resistencia a los medicamentos, la línea celular NCI-H1975 se emplea en evaluaciones preclínicas de terapias combinadas que tienen como objetivo superar la resistencia al actuar sobre múltiples vías. Su perfil genético y molecular bien caracterizado, que incluye datos detallados sobre variaciones en el número de copias y panoramas mutacionales, ha consolidado su estatus como modelo esencial en el estudio de la biología del CPCNP y el desarrollo terapéutico.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.