NCI-H1975

Bunková línia NCI-H1975 je dobre zavedený model odvodený od ľudského nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC), konkrétne adenokarcinómu. Táto bunková línia je obzvlášť významná vďaka dvojitým mutáciám v géne pre receptor epidermálneho rastového faktora (EGFR). Obsahuje aktivačnú mutáciu L858R v exóne 21 a mutáciu T790M v exóne 20, ktorá spôsobuje rezistenciu na inhibítory tyrozínkinázy (TKI) prvej generácie, ako sú gefitinib a erlotinib. Vďaka týmto genetickým vlastnostiam je NCI-H1975 cenným nástrojom na štúdium mechanizmov rezistencie na lieky a testovanie inhibítorov EGFR novej generácie.

Mutácia T790M mení ATP-viažucu kapsu EGFR, čím znižuje účinnosť predchádzajúcich inhibítorov EGFR a zároveň zachováva signalizačnú aktivitu receptora. Táto vlastnosť podnietila výskum inhibítorov tretej generácie, ako je napríklad osimertinib, ktoré selektívne pôsobia na mutantný EGFR T790M, pričom šetria divoký typ EGFR, čím znižujú účinky mimo cieľa. Štúdie s použitím NCI-H1975 prispeli k pochopeniu štrukturálnych a funkčných vplyvov týchto mutácií na signálne dráhy sprostredkované EGFR vrátane následných účinkov na dráhy PI3K/AKT a RAS/RAF/MEK/ERK, ktoré sú kľúčové pri proliferácii a prežívaní nádorových buniek.

Okrem úlohy vo výskume rezistencie na lieky sa NCI-H1975 používa v predklinických hodnoteniach kombinovaných terapií, ktorých cieľom je prekonať rezistenciu zameraním sa na viaceré dráhy. Jeho dobre charakterizovaný genetický a molekulárny profil vrátane podrobných údajov o zmenách v počte kópií a mutačnom prostredí upevnil jeho postavenie ako základného modelu pri štúdiu biológie NSCLC a vývoji liečby.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke