NCI-H3122

Bunková línia NCI-H3122 je odvodená od nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) a je charakterizovaná prítomnosťou fúzneho génu EML4-ALK, ktorý vzniká chromozomálnou translokáciou medzi echinoderm microtubule-associated protein-like 4 (EML4) a anaplastickou lymfokinázou (ALK). Táto fúzia riadi onkogénnu signalizáciu a spôsobuje, že bunky NCI-H3122 sú z hľadiska prežitia vysoko závislé od signalizácie ALK, tzv NCI-H3122 sa stal kľúčovým modelom na štúdium cielenej liečby, najmä inhibítorov ALK, ako je crizotinib.

Štúdie ukázali, že bunky NCI-H3122 sú citlivé na crizotinib, ktorý inhibuje fosforyláciu ALK a jeho následné ciele, ako sú dráhy AKT a ERK. Často však vzniká rezistencia na crizotinib, zvyčajne v dôsledku alternatívnych signálnych dráh, ako je aktivácia receptora epidermálneho rastového faktora (EGFR). Tento mechanizmus rezistencie sa potvrdil v rezistentných variantoch NCI-H3122, kde sa pozorovala zvýšená fosforylácia EGFR, a ukázalo sa, že duálna inhibícia ALK a EGFR pomocou crizotinibu a inhibítorov EGFR, ako je afatinib alebo erlotinib, rezistenciu prekonáva.

NCI-H3122 sa často používa na skúmanie kombinovaných terapií zameraných na prevenciu alebo zvrátenie rezistencie na lieky. Napríklad zacielenie na dráhy ALK aj EGFR bolo úspešnou stratégiou v predklinických modeloch a táto duálna inhibícia bola navrhnutá ako potenciálny terapeutický prístup pre ALK-pozitívnych pacientov s NSCLC rezistentných na krizotinib.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke