NCI-H3122

NCI-H3122 šūnu līnija ir iegūta no plaušu vēža, kas nav mazšūnu plaušu vēzis (NSCLC), un tai ir raksturīgs EML4-ALK fusion gēns, kas rodas hromosomālās translokācijas rezultātā starp ehinodermu mikrotubuliem līdzīgo olbaltumvielu 4 (EML4) un anaplastisko limfomu kināzi (ALK). Šī saplūšana veicina onkogēno signalizāciju un padara NCI-H3122 šūnas ļoti atkarīgas no ALK signalizācijas izdzīvošanas nodrošināšanai, ko dēvē par "ALK atkarīgām" NCI-H3122 ir kļuvusi par galveno modeli mērķterapijas, īpaši ALK inhibitoru, piemēram, krizotinibu, izpētei.

Pētījumi liecina, ka NCI-H3122 šūnas ir jutīgas pret krizotinibu, kas inhibē ALK fosforilēšanu un tās pakārtotos mērķus, piemēram, AKT un ERK ceļus. Tomēr pret krizotinibu bieži attīstās rezistence, ko parasti izraisa alternatīvi signalizācijas ceļi, piemēram, epidermālā augšanas faktora receptora (EGFR) aktivācija. Šis rezistences mehānisms ir apstiprināts NCI-H3122 rezistentajos variantos, kur tika novērota palielināta EGFR fosforilēšana, un tika pierādīts, ka rezistenci pārvar duāla ALK un EGFR inhibīcija, izmantojot krizotinibu un EGFR inhibitorus, piemēram, afatinibu vai erlotinibu.

NCI-H3122 bieži izmanto, lai izpētītu kombinētās terapijas, kuru mērķis ir novērst vai mainīt rezistenci pret zālēm. Piemēram, preklīniskajos modeļos ir bijusi veiksmīga stratēģija, kas vērsta gan pret ALK, gan EGFR ceļiem, un šī duālā inhibīcija ir ierosināta kā potenciāla terapeitiska pieeja ALK pozitīviem, pret krizotinibu rezistentiem NSCLC pacientiem.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu