NCI-H3122
Cell line · Prekės numeris 300484
The NCI-H3122 cell line is derived from non-small-cell lung cancer (NSCLC) and is characterized by the presence of the EML4-ALK fusion gene, which results...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- NCI-H3122Cell line€650.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
NCI-H3122 ląstelių linija yra kilusi iš nesmulkialąstelinio plaučių vėžio (NSLPV) ir pasižymi EML4-ALK sintezės genu, kuris atsiranda dėl chromosominės translokacijos tarp echinodermo į mikrotubulus panašaus baltymo 4 (EML4) ir anaplastinės limfomos kinazės (ALK). Ši sintezė lemia onkogeninį signalą, todėl NCI-H3122 ląstelės yra labai priklausomos nuo ALK signalo, kad išgyventų, vadinamos "priklausomomis nuo ALK" NCI-H3122 tapo pagrindiniu modeliu tikslinių terapijų, ypač ALK inhibitorių, tokių kaip crizotinibas, tyrimams.
Tyrimai parodė, kad NCI-H3122 ląstelės yra jautrios crizotinibui, kuris slopina ALK fosforilinimą ir jo tolesnius taikinius, pavyzdžiui, AKT ir ERK kelius. Tačiau dažnai išsivysto atsparumas crizotinibui, paprastai dėl alternatyvių signalinių kelių, pavyzdžiui, epidermio augimo faktoriaus receptoriaus (EGFR) aktyvacijos. Šis atsparumo mechanizmas patvirtintas NCI-H3122 atspariuose variantuose, kai buvo pastebėtas padidėjęs EGFR fosforilinimas, o dvigubas ALK ir EGFR slopinimas naudojant crizotinibą ir EGFR inhibitorius, tokius kaip afatinibas ar erlotinibas, padėjo įveikti atsparumą.
NCI-H3122 dažnai naudojamas tiriant kombinuotąsias terapijas, kuriomis siekiama užkirsti kelią atsparumui vaistams arba jį panaikinti. Pavyzdžiui, ikiklinikiniuose modeliuose sėkmingai taikyta strategija, nukreipta į ALK ir EGFR kelius, ir šis dvigubas slopinimas buvo pasiūlytas kaip galimas terapinis metodas ALK teigiamam, crizotinibui atspariam NSLPV sergantiems pacientams.
- Audinys
- Plaučiai
- Liga
- Adenokarcinoma
- Sinonimai
- NCI-H3122
- H-3122
- NCIH3122
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Identifikatoriai
- Nuoroda
- NCI-H3122 (Cytion katalogo numeris 300484)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_5160
04Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
06Donoras
- Etninė priklausomybė
- Kaukaziečių
07Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip



.jpg)


.jpg)
.jpg)

