NCI-H3122

يُشتق خط الخلايا NCI-H3122 من سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) ويتميز بوجود جين اندماج الجين EML4-ALK، والذي ينتج عن انتقال كروموسومي بين البروتين الشبيه بالبروتين 4 الشبيه بالأنابيب الدقيقة المرتبطة بالبروتين 4 (EML4) والورم الليمفاوي الكشمي كيناز (ALK). ويؤدي هذا الاندماج إلى تحفيز الإشارات السرطانية ويجعل خلايا NCI-H3122 تعتمد بشكل كبير على إشارات ALK للبقاء على قيد الحياة، والمعروفة باسم "مدمن ALK" وقد أصبح NCI-H3122 نموذجًا رئيسيًا لدراسة العلاجات الموجهة، خاصةً مثبطات ALK مثل كريزوتينيب.

وقد أظهرت الدراسات أن خلايا NCI-H3122 حساسة للكريزوتينيب، الذي يثبط فسفرة ALK وأهدافه النهائية مثل مسارات AKT و ERK. ومع ذلك، غالبًا ما تتطور مقاومة الكريزوتينيب عادةً بسبب مسارات إشارات بديلة مثل تنشيط مستقبل عامل نمو البشرة (EGFR). وقد تم تأكيد آلية المقاومة هذه في المتغيرات المقاومة للكريزوتينيب NCI-H3122، حيث لوحظت زيادة فسفرة مستقبلات عامل نمو البشرة (EGFR)، وقد تبين أن التثبيط المزدوج لـ ALK وEGFR باستخدام كريزوتينيب ومثبطات EGFR مثل أفاتينيب أو إيرلوتينيب يتغلب على المقاومة.

وكثيراً ما يُستخدم NCI-H3122 لاستكشاف العلاجات المركبة التي تهدف إلى منع أو عكس مقاومة الأدوية. على سبيل المثال، كان استهداف كل من مساري ALK وEGFR استراتيجية ناجحة في النماذج ما قبل السريرية، وقد تم اقتراح هذا التثبيط المزدوج كنهج علاجي محتمل لمرضى سرطان الرئة غير صغير الخلايا غير صغير الخلايا (NSCLC) الإيجابيين الذين يعانون من مقاومة الكريات البيضاء، والمصابين بداء الكريات البيضاء، والمقاومين للكريزوتينيب.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان