NCI-H3122

Linia komórkowa NCI-H3122 wywodzi się z niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC) i charakteryzuje się obecnością genu fuzyjnego EML4-ALK, który jest wynikiem translokacji chromosomalnej między białkiem 4 związanym z mikrotubulami szkarłupni (EML4) a kinazą chłoniaka anaplastycznego (ALK). Ta fuzja napędza sygnalizację onkogenną i sprawia, że komórki NCI-H3122 są wysoce zależne od sygnalizacji ALK w celu przetrwania, znane jako "uzależnione od ALK" NCI-H3122 stał się kluczowym modelem do badania terapii celowanych, w szczególności inhibitorów ALK, takich jak kryzotynib.

Badania wykazały, że komórki NCI-H3122 są wrażliwe na kryzotynib, który hamuje fosforylację ALK i jej dalsze cele, takie jak szlaki AKT i ERK. Jednak często rozwija się oporność na kryzotynib, zwykle z powodu alternatywnych szlaków sygnałowych, takich jak aktywacja receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Ten mechanizm oporności został potwierdzony w wariantach opornych na NCI-H3122, w których zaobserwowano zwiększoną fosforylację EGFR, a podwójne hamowanie ALK i EGFR przy użyciu kryzotynibu i inhibitorów EGFR, takich jak afatynib lub erlotynib, okazało się przezwyciężyć oporność.

NCI-H3122 jest często wykorzystywany do badania terapii skojarzonych mających na celu zapobieganie lub odwracanie oporności na leki. Na przykład, celowanie zarówno w szlaki ALK, jak i EGFR było skuteczną strategią w modelach przedklinicznych, a ta podwójna inhibicja została zasugerowana jako potencjalne podejście terapeutyczne dla pacjentów z NSCLC ALK-dodatnich, opornych na kryzotynib.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym