NCI-H3122

Cellinjen NCI-H3122 härrör från icke-småcellig lungcancer (NSCLC) och kännetecknas av förekomsten av fusionsgenen EML4-ALK, som är resultatet av en kromosomal translokation mellan EML4 (echinoderm microtubule-associated protein-like 4) och ALK (anaplastic lymphoma kinase). Denna fusion driver onkogen signalering och gör NCI-H3122-cellerna starkt beroende av ALK-signalering för sin överlevnad, så kallade "ALK-beroende" NCI-H3122 har blivit en viktig modell för att studera målinriktade behandlingar, i synnerhet för ALK-hämmare som crizotinib.

Studier har visat att NCI-H3122-cellerna är känsliga för crizotinib, som hämmar ALK-fosforyleringen och dess nedströmsmål, t.ex. AKT- och ERK-vägarna. Resistens mot crizotinib utvecklas dock ofta, vanligen på grund av alternativa signalvägar som aktivering av den epidermala tillväxtfaktorreceptorn (EGFR). Denna resistensmekanism har bekräftats i resistenta varianter av NCI-H3122, där ökad fosforylering av EGFR observerades, och dubbel hämning av ALK och EGFR med crizotinib och EGFR-hämmare som afatinib eller erlotinib visade sig övervinna resistensen.

NCI-H3122 används ofta för att utforska kombinationsbehandlingar som syftar till att förebygga eller upphäva läkemedelsresistens. Att rikta in sig på både ALK och EGFR har t.ex. varit en framgångsrik strategi i prekliniska modeller, och denna dubbla hämning har föreslagits som en potentiell behandlingsstrategi för ALK-positiva, crizotinibresistenta NSCLC-patienter.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring