NCI-H3122

De NCI-H3122 cellijn is afgeleid van niet-kleincellige longkanker (NSCLC) en wordt gekenmerkt door de aanwezigheid van het EML4-ALK fusiegen, dat het resultaat is van een chromosomale translocatie tussen echinoderm microtubule-geassocieerd proteïne-achtig 4 (EML4) en anaplastisch lymfoom kinase (ALK). Deze fusie stimuleert oncogene signalering en maakt NCI-H3122 cellen sterk afhankelijk van ALK signalering om te overleven, ook wel bekend als "ALK-verslaafd" NCI-H3122 is een belangrijk model geworden voor het bestuderen van doelgerichte therapieën, met name voor ALK-remmers zoals crizotinib.

Studies hebben aangetoond dat NCI-H3122 cellen gevoelig zijn voor crizotinib, dat de fosforylering van ALK en zijn downstream targets zoals de AKT en ERK pathways remt. Resistentie tegen crizotinib ontwikkelt zich echter vaak, meestal door alternatieve signaalwegen zoals de activering van de epidermale groeifactorreceptor (EGFR). Dit resistentiemechanisme is bevestigd in NCI-H3122 resistente varianten, waarbij verhoogde EGFR fosforylering werd waargenomen, en dubbele remming van ALK en EGFR met crizotinib en EGFR-remmers zoals afatinib of erlotinib bleek de resistentie te overwinnen.

NCI-H3122 wordt vaak gebruikt om combinatietherapieën te onderzoeken die gericht zijn op het voorkomen of omkeren van geneesmiddelenresistentie. Het aanpakken van zowel de ALK- als de EGFR-route is bijvoorbeeld een succesvolle strategie gebleken in preklinische modellen, en deze dubbele remming is voorgesteld als een potentiële therapeutische aanpak voor ALK-positieve, crizotinib-resistente NSCLC-patiënten.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring