NCI-H3122

สายพันธุ์เซลล์ NCI-H3122 มีต้นกำเนิดจากมะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก (NSCLC) และมีลักษณะเด่นคือการมียีนฟิวชัน EML4-ALK ซึ่งเกิดจากการเคลื่อนย้ายโครโมโซมระหว่างโปรตีนที่คล้ายกับโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับไมโครทูบูลในสัตว์จำพวกปลาดาว (echinoderm microtubule-associated protein-like 4, EML4) และโปรตีนอะนาพลาสติกไลม์โฟมาไคเนส (anaplastic lymphoma kinase, ALK)การหลอมรวมนี้กระตุ้นการส่งสัญญาณก่อมะเร็งและทำให้เซลล์ NCI-H3122 ขึ้นอยู่กับการส่งสัญญาณ ALK อย่างสูงในการอยู่รอด ซึ่งเรียกว่า "ALK-addicted" NCI-H3122 ได้กลายเป็นแบบจำลองสำคัญสำหรับการศึกษาการรักษาแบบมุ่งเป้า โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวยับยั้ง ALK เช่น crizotinib

การศึกษาพบว่าเซลล์ NCI-H3122 มีความไวต่อคริโซทินิบ ซึ่งยับยั้งการฟอสโฟรีเลชันของ ALK และเป้าหมายในเส้นทางที่อยู่ถัดไป เช่น เส้นทาง AKT และ ERKอย่างไรก็ตาม การดื้อต่อคริโซตินิบมักเกิดขึ้น โดยทั่วไปเกิดจากเส้นทางการส่งสัญญาณทางเลือก เช่น การกระตุ้นตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGFR) กลไกการดื้อต่อนี้ได้รับการยืนยันในสายพันธุ์ที่ดื้อต่อ NCI-H3122 ซึ่งพบการเพิ่มขึ้นของการฟอสโฟรีเลชันของ EGFR และการยับยั้งแบบคู่ของ ALK และ EGFR โดยใช้คริโซตินิบและตัวยับยั้ง EGFR เช่น อาฟาทินิบหรือเออร์โลทินิบ แสดงให้เห็นว่าสามารถเอาชนะการดื้อต่อได้

NCI-H3122 ถูกใช้บ่อยในการศึกษาการบำบัดแบบผสมผสานที่มุ่งเน้นการป้องกันหรือย้อนกลับการดื้อยา ตัวอย่างเช่น การมุ่งเป้าไปที่ทั้งเส้นทาง ALK และ EGFR เป็นกลยุทธ์ที่ประสบความสำเร็จในแบบจำลองก่อนคลินิก และการยับยั้งสองทางนี้ได้ถูกเสนอเป็นแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับผู้ป่วย NSCLC ที่มี ALK เป็นบวกและดื้อต่อยา crizotinib

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.