NCI-H3122

NCI-H3122細胞株は非小細胞肺がん（NSCLC）に由来し、棘皮動物微小管関連タンパク質様4（EML4）と未分化リンパ腫キナーゼ（ALK）の染色体転座に起因するEML4-ALK融合遺伝子の存在が特徴である。この融合はがん化シグナル伝達を駆動し、NCI-H3122細胞を生存のためにALKシグナル伝達に高度に依存させ、"ALK中毒 "として知られている。NCI-H3122は、標的治療、特にクリゾチニブのようなALK阻害剤を研究するための重要なモデルとなっている。

研究によると、NCI-H3122細胞はALKのリン酸化とその下流の標的であるAKT経路やERK経路などを阻害するクリゾチニブに対して感受性がある。しかしながら、クリゾチニブに対する耐性はしばしば発現し、その典型的な原因は上皮成長因子受容体（EGFR）の活性化のような代替シグナル伝達経路である。この耐性機序はNCI-H3122耐性変異体において確認されており、EGFRリン酸化の増加が観察され、クリゾチニブとアファチニブやエルロチニブなどのEGFR阻害剤を用いたALKとEGFRの二重阻害により耐性が克服されることが示された。

NCI-H3122は、薬剤耐性を予防または逆転させることを目的とした併用療法を検討するために頻繁に使用される。例えば、ALK経路とEGFR経路の両方を標的とすることは前臨床モデルにおいて成功した戦略であり、この二重阻害はALK陽性でクリゾチニブ抵抗性のNSCLC患者に対する潜在的な治療アプローチとして示唆されている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。