NCI-H3122

קו התאים NCI-H3122 נגזר מסרטן ריאות לא קטן תאים (NSCLC) ומאופיין בנוכחות הגן הממוזג EML4-ALK, הנובע מהעברה כרומוזומלית בין החלבון EML4 (echinoderm microtubule-associated protein-like 4) לבין החלבון ALK (anaplastic lymphoma kinase). איחוי זה מוביל לאיתות אונקוגני וגורם לתאי NCI-H3122 להיות תלויים במידה רבה באיתות ALK לצורך הישרדותם, תופעה המכונה "התמכרות ל-ALK". NCI-H3122 הפך למודל מרכזי לחקר טיפולים ממוקדים, במיוחד עבור מעכבי ALK כגון קריזוטיניב.

מחקרים הראו שתאי NCI-H3122 רגישים לקריזוטיניב, המעכב את זרחון ALK ואת היעדים במורד הזרם שלו, כגון מסלולי AKT ו-ERK. עם זאת, לעתים קרובות מתפתחת עמידות לקריזוטיניב, בדרך כלל עקב מסלולי איתות חלופיים כמו הפעלת קולטן גורם הגדילה האפידרמלי (EGFR). מנגנון עמידות זה אושר בגרסאות עמידות ל-NCI-H3122, שבהן נצפתה עלייה בזרחון EGFR, והוכח כי עיכוב כפול של ALK ו-EGFR באמצעות קריזוטיניב ומעכבי EGFR כמו אפטניב או ארלוטיניב מתגבר על העמידות.

NCI-H3122 משמש לעתים קרובות לחקר טיפולים משולבים שמטרתם למנוע או להפוך עמידות לתרופות. לדוגמה, מיקוד במסלולי ALK ו-EGFR היה אסטרטגיה מוצלחת במודלים פרה-קליניים, ועיכוב כפול זה הוצע כגישה טיפולית פוטנציאלית לחולים עם NSCLC חיובי ל-ALK ועמיד לקריזוטיניב.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו